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mtt使用费用

发布时间:2021-06-22 02:55:16

㈠ 请问96孔板做MTT您怎么做的不浪费板,每天铺一次应该怎么铺呢

比如你要测1-3天的嘛 第一天铺一个孔 平行样的话就一组孔 第二天铺再铺一组 第三天再铺一组 这样到第四天你板上面不就有长了1-3天都有的细胞了嘛
如果不是要这样连续测几天的 那就用完一次后 把板子照紫外 然后再用别的孔 因为除了拿去测吸光度 板子不会受到多少污染 所以照了紫外可以继续用

㈡ 请教一下 MT/7 MT/5 MTT24 二氧化碳灭火器 总重量多少谢谢

灭火器的总重量是灭火器钢瓶的重量和灭火剂充装量的和。MT/7、MT/5、MTT24只显示了二氧化碳额定充装量,充装量分别是7KG、5KG、24KG。并没有灭火器钢瓶的重量,因此,无法给出准确的重量。

国家标准GB/T 5099-1994《钢质无缝气瓶》对灭火器钢瓶的材质、壁厚、压力等参数进行了规定,对于重量方面,只对手提式灭火器的最大总质量进行了规定。因此,只要生产厂家生产的钢瓶参数符合国标,充装后总质量小于标准要求即可。

国家标准GB 4351.1-2005《手提式灭火器 第1部分:性能和结构要求》中要求,灭火器总质量不应大于20kg,其中二氧化碳灭火器总质量不应大于23kg(手提式灭火器)。

(2)mtt使用费用扩展阅读:

二氧化碳灭火器使用方法

1、使用方法

先拔出保险销,再压合压把,将喷嘴对准火焰根部喷射。

2、注意事项

使用时要尽量防止皮肤因直接接触喷筒和喷射胶管而造成冻伤。扑救电器火灾时, 如果电压超过600伏, 切记要先切断电源后再灭火。

3、应用范围

适用于A、B、C类火灾,不适用于金属火灾。扑救棉麻、纺织品火灾时,应注意防止复燃。由于二氧化碳灭火器灭火后不留痕迹,因此适宜扑救家用电器火灾。

A类火灾指固体物质火灾,如木料、布料、纸张、橡胶、塑料等燃烧形成的火灾。

B类火灾指液体火灾和可溶化的固体物质火灾,如可燃易燃液体和沥青、石蜡等燃烧形成的火灾。

C类火灾指气体火灾,如煤气、天然气、甲烷、氢气等燃烧形成的火灾。

D类火灾指金属火灾,如钾、钠、镁等金属燃烧形成的火灾。

㈢ 财管睡前损益为什么和成本没关系

财管税前损益为什么和成本没关系,因为成本是固定的
假设成本固定,那么税前就没有损益
http://..com/link?url=_pkhSNaeoSfSJiXdk8-wB_Enrb9xsyWsX2YHATWv-Dy
如果是题目,这个简答不错

息税前利润=利润总额+传统利润表中的“利息费用”
税前经营利润=利润总额+管理用利润表中的“利息费用”
管理用利润表中的“利息费用”=传统利润表中的“利息费用”-金融资产投资收益-金融资产公允价值变动损益+金融资产减值损失
税前经营利润=息税前利润-金融资产投资收益-金融资产公允价值变动损益+金融资产减值损失
如果不存在金融资产投资收益、金融资产公允价值变动损益、金融资产减值损失,那么税前经营利润是指EBIT。

㈣ 贴壁细胞毒性检测用mtt mts,cck8哪种效果好

齐氏生物细胞生物学产品专家认为CCK8更好些,优点如下:

1)使用方便,省去了洗涤细胞,不需要放射性同位素和有机溶剂;

2)CCK-8法能快速检测;

3)CCK-8法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度;

4)CCK-8法的重复性优于MTT 法;

5)CCK-8法对细胞毒性小;

6)CCK-8细胞活性检测试剂中为1瓶溶液,毋需预制,即开即用。


当然,与MTT相比,CCK8有以下2点不足:

1)与MTT法相 比,CCK8和XTT的价格比较贵。

2)CCK8试剂的颜色为淡红色,与含酚红的培养基颜色接近,不注意的话容易产生漏加或多加。


为更好了解CCK8、MTT、XTT等检测方法,齐氏生物细胞生物学产品专家制定下表,以供参考:

㈤ 德州扑克的锦标赛MTT奖金是不是大家的报名费坐满就玩SUG也是吗

觉得时间觉得世界多极化时代的好

㈥ MTT细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒有哪些注意事项

M T T 可以被线粒体内的些脱氢酶还原生结晶状的深紫色产物f o r m a Z a n。在特定溶训存在的情况下,可以被完全溶解。然后通过琚杯仪可以测定490n m波长附近的吸光度。细胞增殖越多越快,则吸光度越高:细胞毒性越大,则吸光度越低使用说明:
1.收集对数期细胞,调整细胞悬浮液浓度,分于96孔构,每孔180u1,3000一10000细胞/孔。
2.置 37'C、 5%C O2 温箱培养使细胞贴壁,培养 6-24 小时。
3.加入适当浓度的受试化合物,继续培养适当时间。
4.小心吸去上清,加入90u1 新鲜培养液,再加入 10u1 M T T溶液,继续培养 4 H。
5.然后吸掉上清,每孔加入 110u1 F o r m a z a n 溶液,置摇床上低速振荡 10 m i n,使结晶物充分溶解。在酶联免疫柃测仪 490 n m 处测量各孔的吸光值。
6.同时设置调零孔(培养基、M TT、 F o r m a z a n溶解液),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、M T T、F orm az a n溶解液),每组设定 3 复孔。
注意事项
1.由于使用 96 孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于 96 孔板周围一圈最容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加 P B S,水或培养液,另一方面,可以把 96 孔板置于靠近培养箱内水源的地方,缓解蒸发
2.M T T 溶液方黄色需避光保存,长时间光照会导致失效。当颜色变为灰绿色时,请勿使用。F o r m az a n 溶解液结冻或产生沉淀时可以 37'C 水溶孵育以促进溶解,并且必须在全部溶解并混匀后使用。
3.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
相关试剂:
12100 D M E M(H)
31800 R P Ml M Edi u m 1640
24800 通用细胞冻存液 S o1a r b i o
P1020 1x P B S , P H7. 2-7. 4 , 0.01M
H1020 H a n K s , 含钙镁, 含酚红
T1300胰蛋白酶一 ED T A 消化液 (0.25%)不含酚红
H1095 1M H e p e s 溶液 (P H7.2-7. 4,无菌)
P1400 青链霉素混合液(100x)

㈦ mtt的实验方法

⒈选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,才能保证MTT结晶形成数量与细胞数呈的线性关系。否则细胞数太多敏感性降低,太少观察不到差异。
⒉药物浓度的设定。一定要多看文献,参考别人的结果再定个比较大的范围先初筛。根据自己初筛的结果缩小浓度和时间范围再细筛。切记!否则,可能你用的时间和浓度根本不是药物的有效浓度和时间。
⒊ 时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,最后得到不同时间点的抑制率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是最好的时间点(因为这个时候的细胞增殖抑制表现的最明显)。
⒋培养时间。200ul的培养液对于10的4~5次方的增殖期细胞来说,很难维持68h,如果营养不够的话,细胞会由增殖期渐渐趋向G0期而趋于静止,影响结果,我们是在48h换液的。
⒌MTT法只能测定细胞相对数和相对活力,不能测定细胞绝对数。做MTT时,尽量无菌操作,因为细菌也可以导致MTT比色OD值的升高。
⒍理论未必都是对的。要根据自己的实际情况调整。
⒎实验时应设置调零孔,对照孔,加药孔。调零孔加培养基、MTT、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、MTT、二甲基亚砜,不同的是对照孔加溶解药物的介质,而加药组加入不同浓度的药物。
⒏避免血清干扰。用含15%胎牛血清培养液培养细胞时,高的血清物质会影响试验孔的光吸收值。由于试验本底增加,会试验敏感性。因此,一般选小于10%胎牛血清的培养液进行。在呈色后,尽量吸净培养孔内残余培养液。 MTT 溶液的配制方法
通常,此法中的MTT 浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。
需要注意的是,MTT法只能用来检测细胞相对数和相对活力,但不能测定细胞绝对数。在用酶标仪检测结果的时候,为了保证实验结果的线性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范围内。
MTT一般最好现用现配,过滤后4℃避光保存两周内有效,或配制成5mg/ml保存在-20度长期保存,避免反复冻融,最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分装在EP管里,用的时候现配,直接往培养板中加,没必要一下子配那么多,尤其当MTT变为灰绿色时就绝对不能再用了。
MTT有致癌性,用的时候小心,有条件最好带那种透明的簿膜手套.配成的MTT需要无菌,MTT对菌很敏感;往96孔板加时不避光也没有关系,毕竟时间较短,或者你不放心的时候可以把操作台上的照明灯关掉.
配制MTT时用用PBS溶解,也有人用生理盐水配,60℃水浴助溶。
PBS配方:
Nacl 8g
Kcl 0.2g
Na2HPO4 1.44g
KH2PO4 0.24g
调pH 7.4
定容1L 1、收集对数期细胞,调整细胞悬液浓度,每孔加入100ul,铺板使待测细胞调密度至1000-10000孔,(边缘孔用无菌PBS填充)。
⒉、5%CO2,37℃孵育,至细胞单层铺满孔底(96孔平底板),加入浓度梯度的药物,原则上,细胞贴壁后即可加药,或两小时,或半天时间,但我们常在前一天下午铺板,次日上午加药.一般5-7个梯度,每孔100ul,设3-5个复孔.建议设5个,否则难以反应真实情况。
⒊、5%CO2,37℃孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
4、每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4h。若药物与MTT能够反应,可先离心后弃去培养液,小心用PBS冲2-3遍后,再加入含MTT的培养液。
5、终止培养,小心吸去孔内培养液。
6、每孔加入150ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10min,使结晶物臢(Zā)充分溶解。在酶联免疫检测仪OD490nm处测量各孔的吸光值。
7、同时设置调零孔(培养基、MTT、二甲基亚砜),对照孔(细胞、相同浓度的药物溶解介质、培养液、MTT、二甲基亚砜)。 1、收集对数期细胞,调节细胞悬液浓度1×106/ml,按次序将①补足的1640(无血清)培养基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培养液稀释 (储存液100mg/ml,需预试寻找最佳稀释度,1:10-1:20);③需检测物10ul;④细胞悬液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(边缘孔用无菌水填充)。每板设对照(加100ml 1640)。
2、置37℃,5%CO2孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。
3、每孔加入10 ul MTT溶液(5 mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4 h。(悬浮细胞推荐使用WST-1,培养4 h后可跳过步骤4,直接酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准)测量各孔的吸光值)。
4、离心(1000转x10min),小心吸掉上清,每孔加入100 ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准)测量各孔的吸光值。 细胞过了30代以后就不要用了,因为状态不好了;培养板要用好的(最好进口板),不好的板或重复利用的板只可做预实验。
接种时最好按照预实验摸索出的密度接种,因为细胞密度在10000/ml左右时,所测得的OD值的区间即细胞抑制率(或者增值率)的所呈现的线性关系最好,结果最可信。如果铺的太稀细胞的杀伤不会很明显,太密细胞可能都会凋亡,因为细胞长的太快营养会不够,最后导致死亡。且而细胞过密或者过少,增殖都会过快或者过慢,其增值率线性关系不佳。故而MTT细胞密度多采用10000/ml,100ul/孔。
细胞密度要根据不同细胞的特点来定。如果你做的药品对细胞具有刺激作用那么取小点的细胞浓度,如果你做的药品对细胞具有抑制作用那么取大点的细胞浓度,这样与对照的区别更明显,数据更好。悬浮细胞每孔的细胞数可达到105,贴壁细胞可为103-104。
其它的声音
⒈首先细胞的接种密度一定不能过大,一般每孔1000个左右就够了,我认为宁少勿多。尤其是对于肿瘤细胞。10000/孔是太高了,这样即使药物有作用,MTT方法也是表现不出的,最佳点板浓度在4000-5000/孔,太少的话SD值会很大。(对于不同的细胞,每孔细胞数要摸索一下,对照组OD在1.4以下为佳,当然通常来说更不要超过2。)
⒉MTT本身就是比较粗的实验,增殖率10%左右的波动都不算奇怪。特别是新手,20%的波动也是常见的,所以很可能是技术原因引起的,特别是种板技术一定要过关。
⒊我做的是肿瘤细胞的MTT实验,这种细胞长的很快一开始我是用100000/ML的浓度来接种的,结果细胞长的太满结果是没有梯度也没有线性关系。后来调整浓度,用过40000~80000/ML的浓度都做过MTT实验,结果发现做的结果比较好点的是60000~70000/ML的浓度组的。用40000/M的浓度的组,由于细胞少,药物作用的梯度还是有,只是没有很好的线性关系。还有根据细胞生长速度以及药物的特性(有时间依赖性和浓度依赖性的药物)来确定培养时间是48小时还是72小时。
注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不等,可以每接几个就要再混匀一下。加样器操作要熟练,尽量避免人为误差。虽然移液器比移液管精确得多,但是如果操作不熟,CV会在8%左右。另外,吹散次数过多也会影响细胞活力。所以要熟练些、快些上板。

㈧ 15亿金币奖池的mtt赛,需要多少万金币的报名费

- -12小时不断很难算啊 平常日常匹配一盘大概60 70金币一盘算三倍就180+了 而且12小时能打几盘谁都算不出来··· 皮肤很难说 反正数量肯定不少··。

㈨ 电信回复mttx是否可以免费提醒流量

尊敬的用户您好
希望下面的回答能够对您有所帮助。
针对手机上网用户,在入网时已提供免费手机上网流量提醒服务,主要包括:
(一)定期提醒。每月一般在6号或7号、16号或17号分两次发送;
(二)阀值提醒。当客户当月手机上网流量达到套餐内所包含流量的80%时发送;
(三)超量提醒。当客户当月手机上网流量达到套餐内所包含流量的100%、200%至500%时分别发送,对于流量超出500%的客户,还将在当月账单中进行提示;
(四)关怀提醒。每月21号或22号,对于使用不足80%的用户进行提醒。 以上提醒均为免费提供,若客户不需要上述提醒,可通安徽电信网上营业厅、安徽电信掌上营业厅、各自有营业厅、10000进行订购、取消。

㈩ 使用mtt法怎么绘制生长曲线怎么计算

其中包含可以用来为某一范围内的活动及其结果制定规则检测标准中都包含检测方法。
检测标准就是一种以文件形式发布的统一协定,其目的是确保检测出的数据能够符合需要、导则或特性定义的技术规范或者其他精确准则。
检测标准、过程。
检测方法就是对特定的检测物进行试验、步骤,依据科学的原理,确定出的试验内容、方式、计算分析等实现需要得出的数据和结果的具体手段和办法、检测方法都是随着科技的不断发展不断的更新,但检测结果要符合检测标准来判定,但是检测方法有些是超前于检测标准中所规定的

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