免疫电镜使用费用

A. 什么是免疫电镜技术

免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察；另一类则是免疫电镜定位技术。该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合，在电子显微镜下观察，由于标准物形成一定的电子密度而指示出相应抗原所在的部位。免疫电镜的应用，使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的水平。其中免疫铁蛋白技术，免疫胶体金技术，免疫酶细胞化学技术等，皆为常用技术。

B. 免疫电镜的原理

该项技术是利用带有特殊标记的抗体与相应抗原相结合，在电子显微镜下观察，由于标准物形成一定的电子密度而指示出相应抗原所在的部位。
根据标记方法的不同， 分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。如免疫铁蛋白技术是将含铁蛋白通过一种低分子量的双功能试剂与抗体结合，成为一种双分子复合物，它既保留抗体的免疫活性，又具有电镜下可见的高电子密度铁离子核心，因此用铁蛋白标记的抗体可通过电镜免疫化学的方法在电镜下定位细胞中的抗原。

C. 包埋前 包埋后免疫电镜 哪个好

成像原理 1．透射电镜技术透射电镜是以电子束透过样品经过聚焦与放大后所产生的物像,投射到荧光屏上或照相底片上进行观察.透射电镜的分辨率为0.0.2nm,放大倍数为几万～几十万倍.由于电子易散射或被物体吸收,故穿透力低,必须制备更薄的超薄切片（通常为50～100nm）.其制备过程与石蜡切片相似,但要求极严格.要在机体死亡后的数分钟钓取材,组织块要小(1立方毫米以内）,常用戊二醛和饿酸进行双重固定树脂包埋,用特制的超薄切片机（ultramicrotome）切成超薄切片,再经醋酸铀和柠檬酸铅等进行电子染色.电子束投射到样品时,可随组织构成成分的密度不同而发生相应的电子发射,如电子束投射到质量大的结构时,电子被散射的多,因此投射到荧光屏上的电子少而呈暗像,电子照片上则呈黑色,称电子密度高（electrondense）.反之,则称为电子密度低（electronlucent）. 2．扫描电镜技术扫描电镜是用极细的电子束在样品表面扫描,将产生的二次电子用特制的探测器收集,形成电信号运送到显像管,在荧光屏上显示物体.（细胞、组织）表面的立体构像,可摄制成照片. 扫描电镜样品用戊二醛和饿酸等固定,经脱水和临界点干燥后,再於样品表面喷镀薄层金膜,以增加二波电子数. 电子显微镜下的纤维扫描电镜能观察较大的组织表面结构,由於它的景深长,1mm左右的凹凸不平面能清所成像,故放样品图像富有立体感.

D. 免疫电镜的影响免疫电镜的一些因素

1．标记物 用于电镜观察的标记物有三类：一类是电子密度致密的标记物，如铁蛋白、辣根过氧化物酶等。另一类则是放射性同位素，如I、S、P、C、H等，第三类则是有独特形状的标记物，如血兰蛋白、噬菌体等。对标记物的要求是：具有特定的形状、不影响抗原抗体复合物的特性与形状。目前用于免疫电镜的标记物主要是铁蛋白和HRP。两者各有其优点，铁蛋白电子密度致密。观察时反差大，优于酶标记，但铁蛋白分子量大(460 000)，穿透能力差，所以适于细胞表面抗原的定位，另外铁蛋白的标记过程比较复杂。HRP分子量小(40 000)，穿透力强，有利于标记抗体进入细胞内，适于细胞内的抗原定位。
2．固定剂 固定是免疫电镜较关键的一步，免疫电镜中的固定与一般超薄切片中的固定的不同之点在于既考虑保存细胞的超微结构,又要考虑到抗原的失活性问题。
（1）固定剂的要求：①不损害细胞内抗原的活性；②固定速度快、效果好；③分子量小，易于渗透；④固定后,不引起交联，造成空间的阻碍，影响标记抗体进入抗原位。
（2）影响固定的因素有：①采用固定剂的种类；②固定剂的浓度，浓度过大，对抗原的活性有影响，浓度过小，固定效果差；③固定剂的pH；④固定剂的温度,一般采用2℃～4℃冷固定；这样能降低细胞的自浴作用和水分的抽提；⑤固定时间与温度有关，温度高，固定快，也与缓冲系的离子强度有关，离子强度大，渗透压大，穿透力强，固定要快。不同的固定剂，或同一固定剂的不同浓度所需的固定时间也不一致；⑥与被固定的细胞类型有关。目前常用的固定系统有：4%聚甲醛，1.5%～2%戊二醛，1%多聚甲醛+1%戊二醛，4%多聚甲醛+0.5%苦味酸+0.25%戊二醛，96%乙醇+1%醋酸。不论采用哪些系统，使用前必须用已知效价的抗原做一系列预实验。如固定剂的种类浓度、温度、pH及固定时间等。然后做出预处理的效价，作为失活参考以再选择最适条件。
例如由于某些固定技术（如锇酸固定）对抗体抗原的结合有干扰，因此应采取较为温和的样品制备方法。
3．非特异性吸附 非特异性吸附与酶标抗体、抗血清的稀释度、染色时间，温度及介质等有关，其中最主要的是抗血清及标记抗体的稀释。一般认为高效价抗血清或标记抗体稀释到低蛋白浓度，用于标记染色可获得最理想的结果。因为低蛋白浓度有利于降低非特异性吸附。实际应用的蛋白浓度大致在0.50mg/ml～2mg/ml。工作效价一般在1︰20～1︰400,在实际工作中，将标记抗体或抗血清稀释到1︰100倍以上则可获得理想的阳性结果，而非特异性吸附必然降得很低。工作浓度的选择是将标记抗体或抗血清作1︰2、1︰4、1︰8……1︰256的稀释，做已知阳性标本的标记染色观察，取其阳性沉积物明显，而非特异性吸附最低的一稀释度做为工作浓度。4．标记染色法 标记染色法分为直接染色法与间接染色法两种。前者的特点是特异性较高,敏感性低，标记抗体只能用于检测一种抗原。后者敏感性较强，一种标记抗体可用于多种抗原的检测。缺点是特异性较差。

E. 司法鉴定收费标准

导读：司法鉴定是某些案件必不可少的一个环节，司法鉴定要到专门的鉴定机构，司法鉴定主要是法医类鉴定，司法鉴定收费项目和收费标准是什么呢?下面小编整理了相关内容，详情请看下文。

(五) 法医人类学鉴定

60 -像重合鉴定 例 1200

61 -像面貌画像 例 1000

62 -像面貌塑像 例 500

63 尸骨个体识别 例 1000

64 人类学骨龄鉴定 例 1000

65 法医人类学鉴定文证审查 例 500 (六) 法医精 神病鉴定

66 精神状态鉴定 例 600 包括智能障碍评定、精神疾病医学诊断等

67 刑事能力评定 例 1500 包括责任能力、服刑能力、性自卫能力等

68 民事能力评定 例 1500 包括民事行为能力、劳动能力等

69 诉讼能力评定 例 1000 包括受审能力、作证能力、诉讼行为能力等

70 司法精神病因果关系鉴定 例 2000 包括精神损失、精神伤残评定、精神伤病关系鉴定等

71 多导心理生理检测评定 例 2000

72 法医精神病鉴定文证审查 例 1000

注：“法医病理鉴定”中的(二)“法医临床鉴定”和(六)“法医精神病鉴定”需要进行医学辅助检查的，检查收费标准按照当地价格主管部门制定的相应医疗服务收费标准另行收取费用。

二、物证类类别

序号 收费项目 单位 基准价(元) 备注

(一) 文书鉴定

1 笔迹鉴定 项 1000

2 印章印文鉴定 项 1000

3 印刷文件同一性、同源性鉴定 项 1200

4 文件制作方法鉴定 件 1200

5 印刷机具鉴定 件 1200

6 文书形成时间鉴定 项 2200

7 朱墨或文字时序鉴定 项 2200

8 变造文件鉴定 项 1200

9 污损文件鉴定 项 1200

10 证件、证书、票据真伪鉴定 件 1200

11 字迹压痕显现 件 1000

12 文书物质材料鉴定 项 1000

13 文书鉴定文证审查 例 800

涉及财产案件，标的额不超过10万元的，按照本表左侧所例收费标准执行;标的额在10万元以上的，按照本办法第八条规定执行。

(二) 痕迹 鉴定

14 手印鉴定 枚 800 涉及财产案件，收费办法同上。 痕迹鉴定均以检材数量为单位基数，不计样本数量

15 足迹鉴定 枚 680 痕迹鉴定均以检材数量为单位基数，不计样本数量

16 工具痕迹鉴定 个 850 同上

17 弹头弹壳痕迹鉴定 枚 880 同上

18 枪支性能及致伤力鉴定 支 1000 同上

19 弹道分析鉴定 例 1000 同上

20 枪弹检验建档 支 200 同上

21 动物蹄迹痕迹鉴定 枚 780 同上

22 整体分离痕迹鉴定 件 630 同上

23 钥匙痕迹鉴定 件 640 同上

24 纺织品痕迹鉴定 件 650 同上

25 玻璃破碎痕迹鉴定 件 650 同上

26 牙齿痕迹鉴定 件 850 同上

27 唇纹痕迹鉴定 个 650 同上

28 皮肤纹痕迹鉴定 个 850 同上

29 耳廓痕迹鉴定 个 650 同上

30 车辆轮迹鉴定 个 850 同上

31 车辆痕迹鉴定 辆 1000 同上

32 机动车辆号码化学显现 组 380 同上

33 痕迹显现 件 400 同上

34 实物照片与实物同一鉴定 件 600 同上

35 物体爆破(裂)痕迹鉴定 件 1000 同上

36 常见炸药鉴定 项 1000 同上

37 导火索、导爆索鉴定 段 800 同上

38 火雷管、电雷管鉴定 段 1000 同上

39 制式手榴弹、手雷鉴定 项 800 同上

40 爆炸装置鉴定 项 2000 同上

41 痕迹鉴定文证审查 例 800

42 扫描电镜/x射线能谱仪成分检验(定性) 样本 460

43 扫描电镜/x射线能谱仪比对检验 组 1000

(三) 微量物证理化检验鉴定

44 射击、爆炸残留物的扫描电镜/x射线能谱仪成分检验 样本 1200

45 傅立叶(显微)显微红外光 谱仪成分检验 样本 350

46 傅立叶(显微)显微红外光 谱仪成分比对检验 组 650

47 偏振光显微镜检验 样本 200

48 薄层色谱检验 样本 200

49 拉曼(激光)光谱仪检验 样本 400

50 (激光)等离子发射光谱仪/质谱仪成分检验 样本 700 超过5个元素的，每增加一个元素加收100元

51 (激光)等离子发射光谱仪/ 质谱仪成分比对检验 元素 300 需定量检验，每元素加收50%

52 气相色谱/质谱仪检验 样本 400 需定量检验，每样本·目标物加收50%

53 裂解-气相色谱/质谱仪检验 样本 350 同上

54 气相色谱检验 样本 300 同上

55 热差、热重仪检验 样本 300 同上

56 X射线荧光光谱仪检验 样本 350 同上

57 X射线衍射仪检验 样本 400 同上

58 离子色谱或离子色谱/质谱仪检验 样本 350 同上

59 微量物证理化检验鉴定文证审查 例 800

三、声像资料类类别

序号 收费项目 单位 基准价(元) 备注

(一) 电子数 据鉴定

1 硬盘检验 GB 20 包括台式机硬盘、笔记本硬盘、移动硬盘

2 服务器检验 GB 30 包括磁盘阵例柜、网络硬盘等

3 CD及DVD光盘检测鉴定 片 200

4 U盘及存储卡检测鉴定 个 300 含SIM卡

5 软盘检测鉴定 张 100

6 电子设备检验鉴定 个 600 包括录音笔、传真机、电子秤等同类电子设备

7 存储介质物理故障排除 部件 900 包括调换磁头、电机;更换PCB板;坏扇处理等

8 手机机身检验 个 900

9 注册表检验鉴定 个 1000

10 软件一致性检验鉴定 100个程 序行 120

11 软件功能检验 个 1500 按每个检验的软件收费

12 文件一致性检验鉴定 对 800

13 数据库数据恢复 个 3500

14 数据库一致性检验鉴定 对 4200

15 其他电子数据检验鉴定 MB 5 包括网络数据包等

16 密码破解 个 1500

17 现场数据获取 GB 8

18 网络数据获取 接入小时 260

19 光盘朔源检验 片 600

20 光盘刻录机检验 片 800

21 电子物证鉴定文证复审 例 1200

(二) 声像资 料鉴定

22 录音资料中话者同一认定 人 2200

23 录音资料辨识 件 1200 按每20分钟计收

24 录音资料的真实性完整性鉴定 件 2000 按每20分钟计收

25 录音资料的降噪处理 件 1800 按每20分钟计收

26 语音分析检验 件 800 按每20分钟计收

27 录音器材检验 件 600

28 录像资料同一性认定 件 2200

29 录像资料辨识 件 900

30 录像资料的真实性完整性鉴定 件 1500 按每20分钟计收

31 录像资料的模糊图像处理 件 1800

32 图片资料同一性认定 件 1800

33 图片资料辨识 件 800

34 图片资料的真实性完整性鉴定 件 1500

35 图片资料的模糊图像处理 件 1000

36 人像鉴定 件 800

37 特种光学技术检验 件 500

38 多(超)光谱检验 件 800

39 计算机人像组合 件 500

40 手工模拟画像 件 800

41 手工雕塑复原头像 件 2000

42 计算机模拟复原头像 件 1000

43 声像资料鉴定文证复审 件 1200

F. 免疫荧光和免疫电镜有何异同

标记原理相同，标记物不同，观察方法不同。

G. 免疫电镜技术的常用方法有哪些

在电镜下直接观察抗原和抗体的结合反应，称为免疫吸附电镜或免疫电镜技术。它具有准确、快速、灵敏度高和操作简便等优点，在抗血清效价很低时仍有较明显的反应。免疫电镜技术有下列常用的方法。

1 诱捕法

（1）包被抗血清 铜网膜面覆于抗血清液滴上（抗血清的稀释度应先试验确定），5～10min，反应时加盖，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（3）包被检测样品 铜网膜覆于病组织浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（5）负染 用2%醋酸双氧铀负染数秒，吸干。

（6）电镜观察 凡抗原和抗体有反应，则在铜网膜上能捕获到较多的粒体。可以提高病毒检测效率10～100倍。本法适宜各种形状的病毒粒体。

2 修饰法

（1）包被抗血清 铜网膜面覆于抗血清液滴上（抗血清的稀释度应先试验确定），5～10min，反应时加盖，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（3）包被检测样品 铜网膜覆于病组织浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（5）铜网膜再置抗血清中[比（1）所用抗血清浓度约高50～100倍]10min。

（6）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（7）负染 用2%醋酸双氧铀负染数秒，吸干。

（8）电镜观察 凡抗原和抗血清呈阳性反应的，病毒粒体比一般浸渍法多，病毒粒体表面布满抗体分子，使粒体体积变大，适用于观察除球状以外的病毒。

3 A-蛋白的修饰法

本法适宜于抗血清效价较低，用一般修饰法又难以判断结果的。由于抗体上又结合A-蛋白，使粒体外的“外套”加厚，便于判断。比诱捕法提高检测效率1～2倍。步骤如下：

（1）包被抗血清 铜网膜面覆于抗血清液滴上（抗血清的稀释度应先试验确定），5～10min，反应时加盖，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（3）包被检测样品 铜网膜覆于病组织浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（5）蘸取20%A-蛋白液，吸干。

（6）洗涤 用10～30滴蒸馏水滴冲洗铜网膜，滤纸吸干。

（7）负染 用2%醋酸双氧铀负染数秒，吸干。

（8）电镜观察。

H. 什么时候使用免疫荧光技术，什么时候应该使用免疫电镜，有何区别

检测水平不一样 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察；另一类则是免疫电镜定位技术。免疫电镜的应用，使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的水平。 而免疫荧光技术将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，从而可对抗原进行细胞定位。
前者属于主动发现 实验重要时可以使用 后者属于被动发现 一般实验都可以满足

I. 免疫荧光和免疫电镜有何异同

使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的水平。 而免疫荧光技术将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。它主要分为两大类，从而可对抗原进行细胞定位：一类是免疫凝集电镜技术；另一类则是免疫电镜定位技术，再经负染色直接在电镜下观察，即采用抗原抗体凝集反应后。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出，是在超微结构水平研究和观察抗原检测水平不一样 免疫电镜技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物、抗体结合定位的一种方法学。免疫电镜的应用

J. 免疫电镜的介绍

免疫电镜(immunoelectron micros)技术是免疫化学技术与电镜技术结合的产物，是在超微结构水平研究和观察抗原、抗体结合定位的一种方法学。它主要分为两大类：一类是免疫凝集电镜技术，即采用抗原抗体凝集反应后，再经负染色直接在电镜下观察；另一类则是免疫电镜定位技术。免疫电镜的应用，使得抗原和抗体定位的研究进入到亚细胞的水平。