胚胎分割成果

A. 人類胚胎幹細胞研究的目的

主要用於克隆技術
其實就是從動物A上拿一個細胞，取出細胞核！再到同種動物B的身上拿一個細胞，去掉細胞核！把取出來的細胞核放到另一個去掉細胞核的細胞中！再把它放到同種動物母體C的子宮中！這樣將C將會生出一個和A一模一樣的動物來！還有就是直接拿一種動物的細胞放到另一種動物的身體里！讓它繁殖出上面的那種動物！
也就是說！有了這種技術！只要有你的一個細胞！你就可以不死！但這種技術國際規定不能用人來做實驗！所以還沒有出現克隆人的情況！一、克隆的早期研究
克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的，例外僅見於有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而，天然的哺乳動物克隆的發生率極低，成員數目太少（一般為兩個），且缺乏目的性，所以很少能夠被用來為人類造福，因此，人們開始探索用人工的方法來生產高等動物克隆。這樣，克隆一詞就開始被用作動詞，指人工培育克隆動物這一動作。

目前，生產哺乳動物克隆的方法主要有胚胎分割和細胞核移植兩種。克隆羊「多莉」，以及其後各國科學家培育的各種克隆動物，採用的都是細胞核移植技術。所謂細胞核移植，是指將不同發育時期的胚胎或成體動物的細胞核，經顯微手術和細胞融合方法移植到去核卵母細胞中，重新組成胚胎並使之發育成熟的過程。與胚胎分割技術不同，細胞核移植技術，特別是細胞核連續移植技術可以產生無限個遺傳相同的個體。由於細胞核移植是產生克隆動物的有效方法，故人們往往把它稱為動物克隆技術。

採用細胞核移植技術克隆動物的設想，最初由漢斯·施佩曼在1938年提出，他稱之為「奇異的實驗」，即從發育到後期的胚胎（成熟或未成熟的胚胎均可）中取出細胞核，將其移植到一個卵子中。這一設想是現在克隆動物的基本途徑。

從1952年起，科學家們首先採用青蛙開展細胞核移植克隆實驗，先後獲得了蝌蚪和成體蛙。1963年，我國童第周教授領導的科研組，首先以金魚等為材料，研究了魚類胚胎細胞核移植技術，獲得成功。

哺乳動物胚胎細胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡爾·伊爾門澤和彼得·霍佩用鼠胚胎細胞培育出發育正常的小鼠。1984年，施特恩·維拉德森用取自羊的未成熟胚胎細胞克隆出一隻活產羊，其他人後來利用牛、豬、山羊、兔和獼猴等各種動物對他採用的實驗方法進行了重復實驗。1989年，維拉德森獲得連續移核二代的克隆牛。1994年，尼爾·菲爾斯特用發育到至少有120個細胞的晚期胚胎克隆牛。到1995年，在主要的哺乳動物中，胚胎細胞核移植都獲得成功，包括冷凍和體外生產的胚胎；對胚胎幹細胞或成體幹細胞的核移植實驗，也都做了嘗試。但到1995年為止，成體動物已分化細胞核移植一直未能取得成功。

二、克隆羊「多莉」的意義和引起的反響
以上事實說明，在1997年2月英國羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細胞克隆羊「多莉」培育成功之前，胚胎細胞核移植技術已經有了很大的發展。實際上，「多莉」的克隆在核移植技術上沿襲了胚胎細胞核移植的全部過程，但這並不能減低「多莉」的重大意義，因為它是世界上第一例經體細胞核移植出生的動物，是克隆技術領域研究的巨大突破。這一巨大進展意味著：在理論上證明了，同植物細胞一樣，分化了的動物細胞核也具有全能性，在分化過程中細胞核中的遺傳物質沒有不可逆變化；在實踐上證明了，利用體細胞進行動物克隆的技術是可行的，將有無數相同的細胞可用來作為供體進行核移植，並且在與卵細胞相融合前可對這些供體細胞進行一系列復雜的遺傳操作，從而為大規模復制動物優良品種和生產轉基因動物提供了有效方法。

在理論上，利用同樣方法，人可以復制「克隆人」，這意味著以往科幻小說中的獨裁狂人克隆自己的想法是完全可以實現的。因此，「多莉」的誕生在世界各國科學界、政界乃至宗教界都引起了強烈反響，並引發了一場由克隆人所衍生的道德問題的討論。各國政府有關人士、民間紛紛作出反應：克隆人類有悖於倫理道德。盡管如此，克隆技術的巨大理論意義和實用價值促使科學家們加快了研究的步伐，從而使動物克隆技術的研究與開發進入一個高潮。

三、近3年來克隆研究的重要成果
克隆羊「多莉」的誕生在全世界掀起了克隆研究熱潮，隨後，有關克隆動物的報道接連不斷。1997年3月，即「多莉」誕生後1個月，美國、中國台灣和澳大利亞科學家分別發表了他們成功克隆猴子、豬和牛的消息。不過，他們都是採用胚胎細胞進行克隆，其意義不能與「多莉」相比。同年7月，羅斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造過的胎兒成纖維細胞克隆出世界上第一頭帶有人類基因的轉基因綿羊「波莉」（Polly）。這一成果顯示了克隆技術在培育轉基因動物方面的巨大應用價值。

1998年7月，美國夏威夷大學Wakayama等報道，由小鼠卵丘細胞克隆了27隻成活小鼠，其中7隻是由克隆小鼠再次克隆的後代，這是繼「多莉」以後的第二批哺乳動物體細胞核移植後代。此外，Wakayama等人採用了與「多莉」不同的、新的、相對簡單的且成功率較高的克隆技術，這一技術以該大學所在地而命名為「檀香山技術」。

此後，美國、法國、荷蘭和韓國等國科學家也相繼報道了體細胞克隆牛成功的消息；日本科學家的研究熱情尤為驚人，1998年7月至1999年4月，東京農業大學、近畿大學、家畜改良事業團、地方（石川縣、大分縣和鹿兒島縣等）家畜試驗場以及民間企業（如日本最大的奶商品公司雪印乳業等）紛紛報道了，他們採用牛耳部、臀部肌肉、卵丘細胞以及初乳中提取的乳腺細胞克隆牛的成果。至1999年底，全世界已有6種類型細胞——胎兒成纖維細胞、乳腺細胞、卵丘細胞、輸卵管／子宮上皮細胞、肌肉細胞和耳部皮膚細胞的體細胞克隆後代成功誕生。

2000年6月，中國西北農林科技大學利用成年山羊體細胞克隆出兩只「克隆羊」，但其中一隻因呼吸系統發育不良而早夭。據介紹，所採用的克隆技術為該研究組自己研究所得，與克隆「多莉」的技術完全不同，這表明我國科學家也掌握了體細胞克隆的尖端技術。

在不同種間進行細胞核移植實驗也取得了一些可喜成果，1998年1月，美國威斯康星一麥迪遜大學的科學家們以牛的卵子為受體，成功克隆出豬、牛、羊、鼠和獼猴五種哺乳動物的胚胎，這一研究結果表明，某個物種的未受精卵可以同取自多種動物的成熟細胞核相結合。雖然這些胚胎都流產了，但它對異種克隆的可能性作了有益的嘗試。1999年，美國科學家用牛卵子克隆出珍稀動物盤羊的胚胎；我國科學家也用兔卵子克隆了大熊貓的早期胚胎，這些成果說明克隆技術有可能成為保護和拯救瀕危動物的一條新途徑。

四、克隆技術的應用前景
克隆技術已展示出廣闊的應用前景，概括起來大致有以下四個方面：（1）培育優良畜種和生產實驗動物；（2）生產轉基因動物；（3）生產人胚胎幹細胞用於細胞和組織替代療法；（4）復制瀕危的動物物種，保存和傳播動物物種資源。以下就生產轉基因動物和胚胎幹細胞作簡要說明。

轉基因動物研究是動物生物工程領域中最誘人和最有發展前景的課題之一，轉基因動物可作為醫用器官移植的供體、作為生物反應器，以及用於家畜遺傳改良、創建疾病實驗模型等。但目前轉基因動物的實際應用並不多，除單一基因修飾的轉基因小鼠醫學模型較早得到應用外，轉基因動物乳腺生物反應器生產葯物蛋白的研究時間較長，已進行了10多年，但目前在全世界范圍內僅有2例葯品進入3期臨床試驗，5～6個葯品進入2期臨床試驗；而其農藝性狀發生改良、可資畜牧生產應用的轉基因家畜品系至今沒有誕生。轉基因動物製作效率低、定點整合困難所導致的成本過高和調控失靈，以及轉基因動物有性繁殖後代遺傳性狀出現分離、難以保持始祖的優良勝狀，是制約當今轉基因動物實用化進程的主要原因。

體細胞克隆的成功為轉基因動物生產掀起一場新的革命，動物體細胞克隆技術為迅速放大轉基因動物所產生的種質創新效果提供了技術可能。採用簡便的體細胞轉染技術實施目標基因的轉移，可以避免家畜生殖細胞來源困難和低效率。同時，採用轉基因體細胞系，可以在實驗室條件下進行轉基因整合預檢和性別預選。在核移植前，先把目的外源基因和標記基因（如LagZ基因和新黴素抗生基因）的融合基因導入培養的體細胞中，再通過標記基因的表現來篩選轉基因陽性細胞及其克隆，然後把此陽性細胞的核移植到去核卵母細胞中，最後生產出的動物在理論上應是100％的陽性轉基因動物。採用此法，Schnieke等（Bio Report，1997）已成功獲得6隻轉基因綿羊，其中3隻帶有人凝血因子IX基因和標記基因（新黴素抗性基因），3隻帶有標記基因，目的外源基因整合率高達50％。Cibelli（Science，1997）同樣利用核移植法獲得3頭轉基因牛，證實了該法的有效性。由此可以看出，當今動物克隆技術最重要的應用方向之一，就是高附加值轉基因克隆動物的研究開發。

胚胎幹細胞（ES）是具有形成所有成年細胞類型潛力的全能幹細胞。科學家們一直試圖誘導各種幹細胞定向分化為特定的組織類型，來替代那些受損的體內組織，比如把產生胰島素的細胞植入糖尿病患者體內。科學家們已經能夠使豬ES細胞轉變為跳動的心肌細胞，使人ES細胞生成神經細胞和間充質細胞和使小鼠ES細胞分化為內胚層細胞。這些結果為細胞和組織替代療法開辟了道路。目前，科學家已成功分離到人ES細胞（Thomson等1998，Science），而體細胞克隆技術為生產患者自身的ES細胞提供了可能。把患者體細胞移植到去核卵母細胞中形成重組胚，把重組胚體外培養到囊胚，然後從囊胚內分離出ES細胞，獲得的ES細胞使之定向分化為所需的特定細胞類型(如神經細胞，肌肉細胞和血細胞），用於替代療法。這種核移植法的最終目的是用於幹細胞治療，而非得到克隆個體，科學家們稱之為「治療克隆」。

克隆技術在基礎研究中的應用也是很有意義的，它為研究配子和胚胎發生，細胞和組織分化，基因表達調控，核質互作等機理提供了工具。

五、克隆技術存在的問題
盡管克隆技術有著廣泛的應用前景，但離產業化尚有很大距離。因為作為一個新興的研究領域，克隆技術在理論和技術上都還很不成熟，在理論上，分化的體細胞克隆對遺傳物質重編（細胞核內所有或大部分基因關閉，細胞重新恢復全能性的過程）的機理還不清楚；克隆動物是否會記住供體細胞的年齡，克隆動物的連續後代是否會累積突變基因，以及在克隆過程中胞質線粒體所起的遺傳作用等問題還沒有解決。

在實踐中，克隆動物的成功率還很低，維爾穆特研究組在培育「多莉「的實驗中，融合了277枚移植核的卵細胞，僅獲得了「多莉」這一隻成活羔羊，成功率只有0.36％，同時進行的胎兒成纖維細胞和胚胎細胞的克隆實驗的成功率也分別只有1.7％和1.1％，即使是使用「檀香山」技術，以分化程度較低的卵丘細胞為核供體，其成功率也只有百分之幾。

此外，生出的部分個體表現出生理或免疫缺限。以克隆牛為例，日本、法國等國培育的許多克隆牛在降生後兩個月內死去；到2000年2月，日本全國已共有121頭體細胞克隆牛誕生，但存活的只有64頭。觀察結果表明，部分犢牛胎盤功能不完善，其血液中含氧量及生長因子的濃度都低於正常水平；有些牛犢的胸腺、脾和淋巴腺未得到正常發育；克隆動物胎兒普遍存在比一般動物發育快的傾向，這些都可能是死亡的原因。

即使是正常發育的「多莉」，也被發現有早衰跡象。染色體的未端被稱為端粒，它決定著細胞能夠分裂的次數：每一次分裂端粒都會縮短，而當端粒耗盡後細胞就失去了分裂能力。1998年，科學家發現「多莉」的細胞端粒比正常的要短，即其細胞處於更衰老的狀態。當時認為，這可能是用成年綿羊的細胞克隆「多莉」造成的，使其細胞具有成年細胞的印記，但這一解釋目前受到了挑戰，美國馬薩諸塞州的醫生羅伯特·蘭扎等用培養的衰老細胞克隆牛，得到6頭小牛，出生5～10個月後發現這些克隆牛的端粒比普通同齡小牛要長，有的甚至比普通新生小牛的端粒還長。現在還不清楚這一現象的原因，也不清楚為何與「多莉「的情況有巨大差別。但這一實驗說明，在一些情況下克隆過程能改變成熟細胞的分子鍾，使其「恢復青春」，關於這種變化對克隆動物壽命的影響，還有待於進一步觀察。

除了以上的理論和技術障礙外，克隆技術（尤其是在人胚胎方面的應用）對倫理道德的沖擊和公眾對此的強烈反應也限制了克隆技術的應用。但幾年來克隆技術的發展表明，世界各科技大國都不甘落後，誰也沒有放棄克隆技術研究。這一點上英國政府的態度非常具有代表性，在1997年2月底宣布中止對「多莉」研究小組投資後不到1個月，英國科技委員會就對克隆技術發表專題報告，表明英國政府將重新考慮這一決定，認為盲目禁止這方面的研究並不是明智之舉，關鍵在於建立一定的規范利用它為人類造福。

B. 為了大力發展我國的肉牛和奶牛養殖業，科學家們在育種途徑中進行了大膽探索，並取得了初步成果。Ⅰ．2002

C. 試管嬰兒、試管苗和克隆羊三者均屬於生物工程技術的傑出成果．下面敘述正確的是（）A．都充分體現了

答案b
試管嬰兒是有性生殖，克隆體現了動物細胞核具有全能性，變異是普遍存在的，三者都利用了細胞工程技術，試管嬰兒和克隆羊應用動物細胞培養技術，試管苗應用植物組織培養技術。

D. 胚胎移植是什麼

所謂胚胎移植，也就是人們所說「人工妊娠」或「借腹懷胎」。它是首先應用於繁殖家畜而發展起來的一種生物工程。

有了優良品種，如何在短時間內大量繁殖，迅速推廣應用，這是畜牧業長期難以解決的問題之一。例如一頭母牛，一年大約僅生一胎，得一頭小牛犢。如此一個優良品種的孕育推廣，菲數十年難有大成效。近10年來，由於生物技術的迅速發展及應用而形成胚胎移植技術，使這一難題迎刃而解。

胚胎移植在繁殖家畜的應用原理與過程是十分巧妙的。如牛在自然狀態下每次排卵只排1個，應用超數排卵技術可以使母牛多產卵。這就是在母牛發情周期的第9～14天時，注射作為排卵劑的促性腺激素。接著，2～3天後再注射黃體素，再過兩天後母牛就會發情，並能超數排卵。原來只能排出1個成熟卵細胞的卵巢，一次就能排出10來個、甚至多達40個以上的成熟卵細胞。這時，選擇優良公牛的精液，或者利用冷凍保存的良種精液，進行人工授精。等待人工授精的母牛發情後的第6～8天，從它的子宮內採取胚胎。如果胚胎發育正常的話，通常將此早期胚胎送置於攝氏37度的養母的子宮內，於10小時內進行胚胎移植。

胚胎也可保存於低溫，或運往世界各地，進行胚胎移植；還可以將此胚胎暫時寄存在兔子的輸卵管內，使它繼續正常發育2～4天，以便再運往遠方進行移植。如果胚胎暫時不準備移植，可將它置於-196攝氏度下凍結保存，待將來移植時，把它解凍後仍能夠正常發育。

胚胎移植已在世界各地普遍開展。英國劍橋大學的科學家波爾格於1980年用卵細胞培育成胚胎，創造了「試管牛」。1987年2月10日，保加利亞北部蘇門洲的一個水牛飼養試驗站飼養的水牛生下1頭試管水牛。這次水牛胚胎移植是保加利亞和美國的畜牧專家共同合作的研究成果，它為比較充分地利用水牛親體的遺傳因子開辟了新路。

E. 胚胎細胞克隆

胚胎細胞克隆 指先從人體卵細胞內取出攜帶有遺傳信息的脫氧核糖核酸(DNA),由此獲得卵空殼,然後再把體細胞克隆，同時又指出，這項技術有關的難題：如果以獲取胚胎幹細胞為目的來克隆人類胚胎，那麼人類在獲取幹細胞的同時也就破壞了這個胚胎。 美國俄勒岡健康科學大學最近在胚胎幹細胞研究方面邁出了一大步。該大學...一個研究小組15日在科學期刊《細胞》網路版上發表文章稱，已經通過「體細胞克隆技術」向卵細胞內植入他人皮膚細胞的細胞核，首次成功製作了能夠分化成各種組織的胚胎幹細胞。該技術與1996年製造克隆羊多利的技術相同。

F. 什麼是克隆技術

一、克隆的早期研究
克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的，例外僅見於有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而，天然的哺乳動物克隆的發生率極低，成員數目太少（一般為兩個），且缺乏目的性，所以很少能夠被用來為人類造福，因此，人們開始探索用人工的方法來生產高等動物克隆。這樣，克隆一詞就開始被用作動詞，指人工培育克隆動物這一動作。

目前，生產哺乳動物克隆的方法主要有胚胎分割和細胞核移植兩種。克隆羊「多莉」，以及其後各國科學家培育的各種克隆動物，採用的都是細胞核移植技術。所謂細胞核移植，是指將不同發育時期的胚胎或成體動物的細胞核，經顯微手術和細胞融合方法移植到去核卵母細胞中，重新組成胚胎並使之發育成熟的過程。與胚胎分割技術不同，細胞核移植技術，特別是細胞核連續移植技術可以產生無限個遺傳相同的個體。由於細胞核移植是產生克隆動物的有效方法，故人們往往把它稱為動物克隆技術。

採用細胞核移植技術克隆動物的設想，最初由漢斯·施佩曼在1938年提出，他稱之為「奇異的實驗」，即從發育到後期的胚胎（成熟或未成熟的胚胎均可）中取出細胞核，將其移植到一個卵子中。這一設想是現在克隆動物的基本途徑。

從1952年起，科學家們首先採用青蛙開展細胞核移植克隆實驗，先後獲得了蝌蚪和成體蛙。1963年，我國童第周教授領導的科研組，首先以金魚等為材料，研究了魚類胚胎細胞核移植技術，獲得成功。

哺乳動物胚胎細胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡爾·伊爾門澤和彼得·霍佩用鼠胚胎細胞培育出發育正常的小鼠。1984年，施特恩·維拉德森用取自羊的未成熟胚胎細胞克隆出一隻活產羊，其他人後來利用牛、豬、山羊、兔和獼猴等各種動物對他採用的實驗方法進行了重復實驗。1989年，維拉德森獲得連續移核二代的克隆牛。1994年，尼爾·菲爾斯特用發育到至少有120個細胞的晚期胚胎克隆牛。到1995年，在主要的哺乳動物中，胚胎細胞核移植都獲得成功，包括冷凍和體外生產的胚胎；對胚胎幹細胞或成體幹細胞的核移植實驗，也都做了嘗試。但到1995年為止，成體動物已分化細胞核移植一直未能取得成功。

二、克隆羊「多莉」的意義和引起的反響
以上事實說明，在1997年2月英國羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細胞克隆羊「多莉」培育成功之前，胚胎細胞核移植技術已經有了很大的發展。實際上，「多莉」的克隆在核移植技術上沿襲了胚胎細胞核移植的全部過程，但這並不能減低「多莉」的重大意義，因為它是世界上第一例經體細胞核移植出生的動物，是克隆技術領域研究的巨大突破。這一巨大進展意味著：在理論上證明了，同植物細胞一樣，分化了的動物細胞核也具有全能性，在分化過程中細胞核中的遺傳物質沒有不可逆變化；在實踐上證明了，利用體細胞進行動物克隆的技術是可行的，將有無數相同的細胞可用來作為供體進行核移植，並且在與卵細胞相融合前可對這些供體細胞進行一系列復雜的遺傳操作，從而為大規模復制動物優良品種和生產轉基因動物提供了有效方法。

在理論上，利用同樣方法，人可以復制「克隆人」，這意味著以往科幻小說中的獨裁狂人克隆自己的想法是完全可以實現的。因此，「多莉」的誕生在世界各國科學界、政界乃至宗教界都引起了強烈反響，並引發了一場由克隆人所衍生的道德問題的討論。各國政府有關人士、民間紛紛作出反應：克隆人類有悖於倫理道德。盡管如此，克隆技術的巨大理論意義和實用價值促使科學家們加快了研究的步伐，從而使動物克隆技術的研究與開發進入一個高潮。

三、近3年來克隆研究的重要成果
克隆羊「多莉」的誕生在全世界掀起了克隆研究熱潮，隨後，有關克隆動物的報道接連不斷。1997年3月，即「多莉」誕生後1個月，美國、中國台灣和澳大利亞科學家分別發表了他們成功克隆猴子、豬和牛的消息。不過，他們都是採用胚胎細胞進行克隆，其意義不能與「多莉」相比。同年7月，羅斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造過的胎兒成纖維細胞克隆出世界上第一頭帶有人類基因的轉基因綿羊「波莉」（Polly）。這一成果顯示了克隆技術在培育轉基因動物方面的巨大應用價值。

1998年7月，美國夏威夷大學Wakayama等報道，由小鼠卵丘細胞克隆了27隻成活小鼠，其中7隻是由克隆小鼠再次克隆的後代，這是繼「多莉」以後的第二批哺乳動物體細胞核移植後代。此外，Wakayama等人採用了與「多莉」不同的、新的、相對簡單的且成功率較高的克隆技術，這一技術以該大學所在地而命名為「檀香山技術」。

此後，美國、法國、荷蘭和韓國等國科學家也相繼報道了體細胞克隆牛成功的消息；日本科學家的研究熱情尤為驚人，1998年7月至1999年4月，東京農業大學、近畿大學、家畜改良事業團、地方（石川縣、大分縣和鹿兒島縣等）家畜試驗場以及民間企業（如日本最大的奶商品公司雪印乳業等）紛紛報道了，他們採用牛耳部、臀部肌肉、卵丘細胞以及初乳中提取的乳腺細胞克隆牛的成果。至1999年底，全世界已有6種類型細胞——胎兒成纖維細胞、乳腺細胞、卵丘細胞、輸卵管／子宮上皮細胞、肌肉細胞和耳部皮膚細胞的體細胞克隆後代成功誕生。

2000年6月，中國西北農林科技大學利用成年山羊體細胞克隆出兩只「克隆羊」，但其中一隻因呼吸系統發育不良而早夭。據介紹，所採用的克隆技術為該研究組自己研究所得，與克隆「多莉」的技術完全不同，這表明我國科學家也掌握了體細胞克隆的尖端技術。

在不同種間進行細胞核移植實驗也取得了一些可喜成果，1998年1月，美國威斯康星一麥迪遜大學的科學家們以牛的卵子為受體，成功克隆出豬、牛、羊、鼠和獼猴五種哺乳動物的胚胎，這一研究結果表明，某個物種的未受精卵可以同取自多種動物的成熟細胞核相結合。雖然這些胚胎都流產了，但它對異種克隆的可能性作了有益的嘗試。1999年，美國科學家用牛卵子克隆出珍稀動物盤羊的胚胎；我國科學家也用兔卵子克隆了大熊貓的早期胚胎，這些成果說明克隆技術有可能成為保護和拯救瀕危動物的一條新途徑。

四、克隆技術的應用前景
克隆技術已展示出廣闊的應用前景，概括起來大致有以下四個方面：（1）培育優良畜種和生產實驗動物；（2）生產轉基因動物；（3）生產人胚胎幹細胞用於細胞和組織替代療法；（4）復制瀕危的動物物種，保存和傳播動物物種資源。以下就生產轉基因動物和胚胎幹細胞作簡要說明。

轉基因動物研究是動物生物工程領域中最誘人和最有發展前景的課題之一，轉基因動物可作為醫用器官移植的供體、作為生物反應器，以及用於家畜遺傳改良、創建疾病實驗模型等。但目前轉基因動物的實際應用並不多，除單一基因修飾的轉基因小鼠醫學模型較早得到應用外，轉基因動物乳腺生物反應器生產葯物蛋白的研究時間較長，已進行了10多年，但目前在全世界范圍內僅有2例葯品進入3期臨床試驗，5～6個葯品進入2期臨床試驗；而其農藝性狀發生改良、可資畜牧生產應用的轉基因家畜品系至今沒有誕生。轉基因動物製作效率低、定點整合困難所導致的成本過高和調控失靈，以及轉基因動物有性繁殖後代遺傳性狀出現分離、難以保持始祖的優良勝狀，是制約當今轉基因動物實用化進程的主要原因。

體細胞克隆的成功為轉基因動物生產掀起一場新的革命，動物體細胞克隆技術為迅速放大轉基因動物所產生的種質創新效果提供了技術可能。採用簡便的體細胞轉染技術實施目標基因的轉移，可以避免家畜生殖細胞來源困難和低效率。同時，採用轉基因體細胞系，可以在實驗室條件下進行轉基因整合預檢和性別預選。在核移植前，先把目的外源基因和標記基因（如LagZ基因和新黴素抗生基因）的融合基因導入培養的體細胞中，再通過標記基因的表現來篩選轉基因陽性細胞及其克隆，然後把此陽性細胞的核移植到去核卵母細胞中，最後生產出的動物在理論上應是100％的陽性轉基因動物。採用此法，Schnieke等（Bio Report，1997）已成功獲得6隻轉基因綿羊，其中3隻帶有人凝血因子IX基因和標記基因（新黴素抗性基因），3隻帶有標記基因，目的外源基因整合率高達50％。Cibelli（Science，1997）同樣利用核移植法獲得3頭轉基因牛，證實了該法的有效性。由此可以看出，當今動物克隆技術最重要的應用方向之一，就是高附加值轉基因克隆動物的研究開發。

胚胎幹細胞（ES）是具有形成所有成年細胞類型潛力的全能幹細胞。科學家們一直試圖誘導各種幹細胞定向分化為特定的組織類型，來替代那些受損的體內組織，比如把產生胰島素的細胞植入糖尿病患者體內。科學家們已經能夠使豬ES細胞轉變為跳動的心肌細胞，使人ES細胞生成神經細胞和間充質細胞和使小鼠ES細胞分化為內胚層細胞。這些結果為細胞和組織替代療法開辟了道路。目前，科學家已成功分離到人ES細胞（Thomson等1998，Science），而體細胞克隆技術為生產患者自身的ES細胞提供了可能。把患者體細胞移植到去核卵母細胞中形成重組胚，把重組胚體外培養到囊胚，然後從囊胚內分離出ES細胞，獲得的ES細胞使之定向分化為所需的特定細胞類型(如神經細胞，肌肉細胞和血細胞），用於替代療法。這種核移植法的最終目的是用於幹細胞治療，而非得到克隆個體，科學家們稱之為「治療克隆」。

克隆技術在基礎研究中的應用也是很有意義的，它為研究配子和胚胎發生，細胞和組織分化，基因表達調控，核質互作等機理提供了工具。

五、克隆技術存在的問題
盡管克隆技術有著廣泛的應用前景，但離產業化尚有很大距離。因為作為一個新興的研究領域，克隆技術在理論和技術上都還很不成熟，在理論上，分化的體細胞克隆對遺傳物質重編（細胞核內所有或大部分基因關閉，細胞重新恢復全能性的過程）的機理還不清楚；克隆動物是否會記住供體細胞的年齡，克隆動物的連續後代是否會累積突變基因，以及在克隆過程中胞質線粒體所起的遺傳作用等問題還沒有解決。

在實踐中，克隆動物的成功率還很低，維爾穆特研究組在培育「多莉「的實驗中，融合了277枚移植核的卵細胞，僅獲得了「多莉」這一隻成活羔羊，成功率只有0.36％，同時進行的胎兒成纖維細胞和胚胎細胞的克隆實驗的成功率也分別只有1.7％和1.1％，即使是使用「檀香山」技術，以分化程度較低的卵丘細胞為核供體，其成功率也只有百分之幾。

此外，生出的部分個體表現出生理或免疫缺限。以克隆牛為例，日本、法國等國培育的許多克隆牛在降生後兩個月內死去；到2000年2月，日本全國已共有121頭體細胞克隆牛誕生，但存活的只有64頭。觀察結果表明，部分犢牛胎盤功能不完善，其血液中含氧量及生長因子的濃度都低於正常水平；有些牛犢的胸腺、脾和淋巴腺未得到正常發育；克隆動物胎兒普遍存在比一般動物發育快的傾向，這些都可能是死亡的原因。

即使是正常發育的「多莉」，也被發現有早衰跡象。染色體的未端被稱為端粒，它決定著細胞能夠分裂的次數：每一次分裂端粒都會縮短，而當端粒耗盡後細胞就失去了分裂能力。1998年，科學家發現「多莉」的細胞端粒比正常的要短，即其細胞處於更衰老的狀態。當時認為，這可能是用成年綿羊的細胞克隆「多莉」造成的，使其細胞具有成年細胞的印記，但這一解釋目前受到了挑戰，美國馬薩諸塞州的醫生羅伯特·蘭扎等用培養的衰老細胞克隆牛，得到6頭小牛，出生5～10個月後發現這些克隆牛的端粒比普通同齡小牛要長，有的甚至比普通新生小牛的端粒還長。現在還不清楚這一現象的原因，也不清楚為何與「多莉「的情況有巨大差別。但這一實驗說明，在一些情況下克隆過程能改變成熟細胞的分子鍾，使其「恢復青春」，關於這種變化對克隆動物壽命的影響，還有待於進一步觀察。

除了以上的理論和技術障礙外，克隆技術（尤其是在人胚胎方面的應用）對倫理道德的沖擊和公眾對此的強烈反應也限制了克隆技術的應用。但幾年來克隆技術的發展表明，世界各科技大國都不甘落後，誰也沒有放棄克隆技術研究。這一點上英國政府的態度非常具有代表性，在1997年2月底宣布中止對「多莉」研究小組投資後不到1個月，英國科技委員會就對克隆技術發表專題報告，表明英國政府將重新考慮這一決定，認為盲目禁止這方面的研究並不是明智之舉，關鍵在於建立一定的規范利用它為人類造福。

G. 改造生物的性狀，在許多領域取得了可喜的成果．圖1是利用奶牛乳汁生產人類血清白蛋白的圖解，請據圖1分析

（1）由圖可知，圖中涉及到的現代生物技術主要有基因工程技術、核移植技術和胚胎移植技術．
（2）將細胞分散成單個細胞常用胰蛋白酶處理；由於卵細胞體積大易操作，且其細胞質中含有促進細胞核表現出全能性的物質，常用卵細胞做受體細胞．
（3）血清白蛋白基因是基因工程的目的基因．DNA探針是指用放射性同位素標記的、含目的基因的DNA單鏈．擴增DNA的方法是PCR技術．
（4）胚胎分割應將內細胞團均等分割，正確操作為C．胚胎移植最佳時期是桑椹胚和囊胚．
（5）移植後的胚胎能在子宮中存活的生理基礎是受體子宮對外來胚胎不發生排斥反應．利用轉基因動物乳汁生產生物產品的方法稱為乳腺生物反應器．核移植的方法得到的動物叫做克隆動物．
故答案為：
（1）胚胎移植
（2）胰蛋白酶 卵細胞體積大易操作，且其細胞質中含有促進細胞核表現出全能性的物質
（3）目的基因 用放射性同位素標記的、含目的基因的DNA單鏈 PCR
（4）C 桑椹胚和囊胚
（5）受體子宮對外來胚胎不發生排斥反應 乳腺生物反應器 克隆動物

H. 胚胎幹細胞的發展前景是什麼

主要用於克隆技術
其實就是從動物A上拿一個細胞，取出細胞核！再到同種動物B的身上拿一個細胞，去掉細胞核！把取出來的細胞核放到另一個去掉細胞核的細胞中！再把它放到同種動物母體C的子宮中！這樣將C將會生出一個和A一模一樣的動物來！還有就是直接拿一種動物的細胞放到另一種動物的身體里！讓它繁殖出上面的那種動物！
也就是說！有了這種技術！只要有你的一個細胞！你就可以不死！但這種技術國際規定不能用人來做實驗！所以還沒有出現克隆人的情況！一、克隆的早期研究
克隆一詞是英文單詞clone的音譯，作為名詞，c1one通常被意譯為無性繁殖系。同一克隆內所有成員的遺傳構成是完全相同的，例外僅見於有突變發生時。自然界早已存在天然植物、動物和微生物的克隆，例如：同卵雙胞胎實際上就是一種克隆。然而，天然的哺乳動物克隆的發生率極低，成員數目太少（一般為兩個），且缺乏目的性，所以很少能夠被用來為人類造福，因此，人們開始探索用人工的方法來生產高等動物克隆。這樣，克隆一詞就開始被用作動詞，指人工培育克隆動物這一動作。

目前，生產哺乳動物克隆的方法主要有胚胎分割和細胞核移植兩種。克隆羊「多莉」，以及其後各國科學家培育的各種克隆動物，採用的都是細胞核移植技術。所謂細胞核移植，是指將不同發育時期的胚胎或成體動物的細胞核，經顯微手術和細胞融合方法移植到去核卵母細胞中，重新組成胚胎並使之發育成熟的過程。與胚胎分割技術不同，細胞核移植技術，特別是細胞核連續移植技術可以產生無限個遺傳相同的個體。由於細胞核移植是產生克隆動物的有效方法，故人們往往把它稱為動物克隆技術。

採用細胞核移植技術克隆動物的設想，最初由漢斯·施佩曼在1938年提出，他稱之為「奇異的實驗」，即從發育到後期的胚胎（成熟或未成熟的胚胎均可）中取出細胞核，將其移植到一個卵子中。這一設想是現在克隆動物的基本途徑。

從1952年起，科學家們首先採用青蛙開展細胞核移植克隆實驗，先後獲得了蝌蚪和成體蛙。1963年，我國童第周教授領導的科研組，首先以金魚等為材料，研究了魚類胚胎細胞核移植技術，獲得成功。

哺乳動物胚胎細胞核移植研究的最初成果在1981年取得——卡爾·伊爾門澤和彼得·霍佩用鼠胚胎細胞培育出發育正常的小鼠。1984年，施特恩·維拉德森用取自羊的未成熟胚胎細胞克隆出一隻活產羊，其他人後來利用牛、豬、山羊、兔和獼猴等各種動物對他採用的實驗方法進行了重復實驗。1989年，維拉德森獲得連續移核二代的克隆牛。1994年，尼爾·菲爾斯特用發育到至少有120個細胞的晚期胚胎克隆牛。到1995年，在主要的哺乳動物中，胚胎細胞核移植都獲得成功，包括冷凍和體外生產的胚胎；對胚胎幹細胞或成體幹細胞的核移植實驗，也都做了嘗試。但到1995年為止，成體動物已分化細胞核移植一直未能取得成功。

二、克隆羊「多莉」的意義和引起的反響
以上事實說明，在1997年2月英國羅斯林研究所維爾穆特博士科研組公布體細胞克隆羊「多莉」培育成功之前，胚胎細胞核移植技術已經有了很大的發展。實際上，「多莉」的克隆在核移植技術上沿襲了胚胎細胞核移植的全部過程，但這並不能減低「多莉」的重大意義，因為它是世界上第一例經體細胞核移植出生的動物，是克隆技術領域研究的巨大突破。這一巨大進展意味著：在理論上證明了，同植物細胞一樣，分化了的動物細胞核也具有全能性，在分化過程中細胞核中的遺傳物質沒有不可逆變化；在實踐上證明了，利用體細胞進行動物克隆的技術是可行的，將有無數相同的細胞可用來作為供體進行核移植，並且在與卵細胞相融合前可對這些供體細胞進行一系列復雜的遺傳操作，從而為大規模復制動物優良品種和生產轉基因動物提供了有效方法。

在理論上，利用同樣方法，人可以復制「克隆人」，這意味著以往科幻小說中的獨裁狂人克隆自己的想法是完全可以實現的。因此，「多莉」的誕生在世界各國科學界、政界乃至宗教界都引起了強烈反響，並引發了一場由克隆人所衍生的道德問題的討論。各國政府有關人士、民間紛紛作出反應：克隆人類有悖於倫理道德。盡管如此，克隆技術的巨大理論意義和實用價值促使科學家們加快了研究的步伐，從而使動物克隆技術的研究與開發進入一個高潮。

三、近3年來克隆研究的重要成果
克隆羊「多莉」的誕生在全世界掀起了克隆研究熱潮，隨後，有關克隆動物的報道接連不斷。1997年3月，即「多莉」誕生後1個月，美國、中國台灣和澳大利亞科學家分別發表了他們成功克隆猴子、豬和牛的消息。不過，他們都是採用胚胎細胞進行克隆，其意義不能與「多莉」相比。同年7月，羅斯林研究所和PPL公司宣布用基因改造過的胎兒成纖維細胞克隆出世界上第一頭帶有人類基因的轉基因綿羊「波莉」（Polly）。這一成果顯示了克隆技術在培育轉基因動物方面的巨大應用價值。

1998年7月，美國夏威夷大學Wakayama等報道，由小鼠卵丘細胞克隆了27隻成活小鼠，其中7隻是由克隆小鼠再次克隆的後代，這是繼「多莉」以後的第二批哺乳動物體細胞核移植後代。此外，Wakayama等人採用了與「多莉」不同的、新的、相對簡單的且成功率較高的克隆技術，這一技術以該大學所在地而命名為「檀香山技術」。

此後，美國、法國、荷蘭和韓國等國科學家也相繼報道了體細胞克隆牛成功的消息；日本科學家的研究熱情尤為驚人，1998年7月至1999年4月，東京農業大學、近畿大學、家畜改良事業團、地方（石川縣、大分縣和鹿兒島縣等）家畜試驗場以及民間企業（如日本最大的奶商品公司雪印乳業等）紛紛報道了，他們採用牛耳部、臀部肌肉、卵丘細胞以及初乳中提取的乳腺細胞克隆牛的成果。至1999年底，全世界已有6種類型細胞——胎兒成纖維細胞、乳腺細胞、卵丘細胞、輸卵管／子宮上皮細胞、肌肉細胞和耳部皮膚細胞的體細胞克隆後代成功誕生。

2000年6月，中國西北農林科技大學利用成年山羊體細胞克隆出兩只「克隆羊」，但其中一隻因呼吸系統發育不良而早夭。據介紹，所採用的克隆技術為該研究組自己研究所得，與克隆「多莉」的技術完全不同，這表明我國科學家也掌握了體細胞克隆的尖端技術。

在不同種間進行細胞核移植實驗也取得了一些可喜成果，1998年1月，美國威斯康星一麥迪遜大學的科學家們以牛的卵子為受體，成功克隆出豬、牛、羊、鼠和獼猴五種哺乳動物的胚胎，這一研究結果表明，某個物種的未受精卵可以同取自多種動物的成熟細胞核相結合。雖然這些胚胎都流產了，但它對異種克隆的可能性作了有益的嘗試。1999年，美國科學家用牛卵子克隆出珍稀動物盤羊的胚胎；我國科學家也用兔卵子克隆了大熊貓的早期胚胎，這些成果說明克隆技術有可能成為保護和拯救瀕危動物的一條新途徑。

四、克隆技術的應用前景
克隆技術已展示出廣闊的應用前景，概括起來大致有以下四個方面：（1）培育優良畜種和生產實驗動物；（2）生產轉基因動物；（3）生產人胚胎幹細胞用於細胞和組織替代療法；（4）復制瀕危的動物物種，保存和傳播動物物種資源。以下就生產轉基因動物和胚胎幹細胞作簡要說明。

轉基因動物研究是動物生物工程領域中最誘人和最有發展前景的課題之一，轉基因動物可作為醫用器官移植的供體、作為生物反應器，以及用於家畜遺傳改良、創建疾病實驗模型等。但目前轉基因動物的實際應用並不多，除單一基因修飾的轉基因小鼠醫學模型較早得到應用外，轉基因動物乳腺生物反應器生產葯物蛋白的研究時間較長，已進行了10多年，但目前在全世界范圍內僅有2例葯品進入3期臨床試驗，5～6個葯品進入2期臨床試驗；而其農藝性狀發生改良、可資畜牧生產應用的轉基因家畜品系至今沒有誕生。轉基因動物製作效率低、定點整合困難所導致的成本過高和調控失靈，以及轉基因動物有性繁殖後代遺傳性狀出現分離、難以保持始祖的優良勝狀，是制約當今轉基因動物實用化進程的主要原因。

體細胞克隆的成功為轉基因動物生產掀起一場新的革命，動物體細胞克隆技術為迅速放大轉基因動物所產生的種質創新效果提供了技術可能。採用簡便的體細胞轉染技術實施目標基因的轉移，可以避免家畜生殖細胞來源困難和低效率。同時，採用轉基因體細胞系，可以在實驗室條件下進行轉基因整合預檢和性別預選。在核移植前，先把目的外源基因和標記基因（如LagZ基因和新黴素抗生基因）的融合基因導入培養的體細胞中，再通過標記基因的表現來篩選轉基因陽性細胞及其克隆，然後把此陽性細胞的核移植到去核卵母細胞中，最後生產出的動物在理論上應是100％的陽性轉基因動物。採用此法，Schnieke等（Bio Report，1997）已成功獲得6隻轉基因綿羊，其中3隻帶有人凝血因子IX基因和標記基因（新黴素抗性基因），3隻帶有標記基因，目的外源基因整合率高達50％。Cibelli（Science，1997）同樣利用核移植法獲得3頭轉基因牛，證實了該法的有效性。由此可以看出，當今動物克隆技術最重要的應用方向之一，就是高附加值轉基因克隆動物的研究開發。

胚胎幹細胞（ES）是具有形成所有成年細胞類型潛力的全能幹細胞。科學家們一直試圖誘導各種幹細胞定向分化為特定的組織類型，來替代那些受損的體內組織，比如把產生胰島素的細胞植入糖尿病患者體內。科學家們已經能夠使豬ES細胞轉變為跳動的心肌細胞，使人ES細胞生成神經細胞和間充質細胞和使小鼠ES細胞分化為內胚層細胞。這些結果為細胞和組織替代療法開辟了道路。目前，科學家已成功分離到人ES細胞（Thomson等1998，Science），而體細胞克隆技術為生產患者自身的ES細胞提供了可能。把患者體細胞移植到去核卵母細胞中形成重組胚，把重組胚體外培養到囊胚，然後從囊胚內分離出ES細胞，獲得的ES細胞使之定向分化為所需的特定細胞類型(如神經細胞，肌肉細胞和血細胞），用於替代療法。這種核移植法的最終目的是用於幹細胞治療，而非得到克隆個體，科學家們稱之為「治療克隆」。

克隆技術在基礎研究中的應用也是很有意義的，它為研究配子和胚胎發生，細胞和組織分化，基因表達調控，核質互作等機理提供了工具。

五、克隆技術存在的問題
盡管克隆技術有著廣泛的應用前景，但離產業化尚有很大距離。因為作為一個新興的研究領域，克隆技術在理論和技術上都還很不成熟，在理論上，分化的體細胞克隆對遺傳物質重編（細胞核內所有或大部分基因關閉，細胞重新恢復全能性的過程）的機理還不清楚；克隆動物是否會記住供體細胞的年齡，克隆動物的連續後代是否會累積突變基因，以及在克隆過程中胞質線粒體所起的遺傳作用等問題還沒有解決。

在實踐中，克隆動物的成功率還很低，維爾穆特研究組在培育「多莉「的實驗中，融合了277枚移植核的卵細胞，僅獲得了「多莉」這一隻成活羔羊，成功率只有0.36％，同時進行的胎兒成纖維細胞和胚胎細胞的克隆實驗的成功率也分別只有1.7％和1.1％，即使是使用「檀香山」技術，以分化程度較低的卵丘細胞為核供體，其成功率也只有百分之幾。

此外，生出的部分個體表現出生理或免疫缺限。以克隆牛為例，日本、法國等國培育的許多克隆牛在降生後兩個月內死去；到2000年2月，日本全國已共有121頭體細胞克隆牛誕生，但存活的只有64頭。觀察結果表明，部分犢牛胎盤功能不完善，其血液中含氧量及生長因子的濃度都低於正常水平；有些牛犢的胸腺、脾和淋巴腺未得到正常發育；克隆動物胎兒普遍存在比一般動物發育快的傾向，這些都可能是死亡的原因。

即使是正常發育的「多莉」，也被發現有早衰跡象。染色體的未端被稱為端粒，它決定著細胞能夠分裂的次數：每一次分裂端粒都會縮短，而當端粒耗盡後細胞就失去了分裂能力。1998年，科學家發現「多莉」的細胞端粒比正常的要短，即其細胞處於更衰老的狀態。當時認為，這可能是用成年綿羊的細胞克隆「多莉」造成的，使其細胞具有成年細胞的印記，但這一解釋目前受到了挑戰，美國馬薩諸塞州的醫生羅伯特·蘭扎等用培養的衰老細胞克隆牛，得到6頭小牛，出生5～10個月後發現這些克隆牛的端粒比普通同齡小牛要長，有的甚至比普通新生小牛的端粒還長。現在還不清楚這一現象的原因，也不清楚為何與「多莉「的情況有巨大差別。但這一實驗說明，在一些情況下克隆過程能改變成熟細胞的分子鍾，使其「恢復青春」，關於這種變化對克隆動物壽命的影響，還有待於進一步觀察。

除了以上的理論和技術障礙外，克隆技術（尤其是在人胚胎方面的應用）對倫理道德的沖擊和公眾對此的強烈反應也限制了克隆技術的應用。但幾年來克隆技術的發展表明，世界各科技大國都不甘落後，誰也沒有放棄克隆技術研究。這一點上英國政府的態度非常具有代表性，在1997年2月底宣布中止對「多莉」研究小組投資後不到1個月，英國科技委員會就對克隆技術發表專題報告，表明英國政府將重新考慮這一決定，認為盲目禁止這方面的研究並不是明智之舉，關鍵在於建立一定的規范利用它為人類造福。
回答者：恬恬小可愛 - 魔法學徒 一級 2-7 12:52
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謝謝哈
評論者： rainyin_in - 經理 四級

太多啦！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！！神經病的人！你好浪費電啊！！！！！
評論者： chenjy0202 - 助理 二級

細胞的生長需要一定的營養環境，用於維持細胞生長的營養基質稱為培養基。培養基按其物理狀態可分為液體培養基和固體培養基。液體培養基用 於大規模的工業生產以及生理代謝等基本理論的研究工作。液體培養基中加入一定的凝固劑或固體培養物便成為固體培養基。
評論者： luoyang2003 - 魔法學徒 一級

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克隆是英文clone的音譯，簡單講就是一種人工誘導的無性繁殖方式。但克隆與無性繁殖是不同的。無性繁殖是指不經過雌雄兩性生殖細胞的結合、只由一個生物體產生後代的生殖方式，常見的有孢子生殖、出芽生殖和分裂生殖。由植物的根、莖、葉等經過壓條或嫁接等方式產生新個體也叫無性繁殖。綿羊、猴子和牛等動物沒有人工操作是不能進行無性繁殖的。科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫克隆，這門生物技術叫克隆技術。

將clone一詞由名詞轉化成動詞，並將核移植稱為 nuclear cloning（核克隆），通過基因工程得到DNA分子的無性系稱為molecular cloning（分子克隆）。在這里克隆是一種實現無性繁殖（asexual reproction）的操作，是一種顯微操作或分子生物學操作，而不是一般意義上的無性繁殖（或無性繁殖操作）。這也許正是克隆一詞能夠存在而不被無性繁殖替代的原因。

克隆的基本過程是先將含有遺傳物質的供體細胞的核移植到去除了細胞核的卵細胞中，利用微電流刺激等使兩者融合為一體，然後促使這一新細胞分裂繁殖發育成胚胎，當胚胎發育到一定程度後，再被植入動物子宮中使動物懷孕，便可產下與提供細胞者基因相同的動物。這一過程中如果對供體細胞進行基因改造，那麼無性繁殖的動物後代基因就會發生相同的變化

I. 隨著科學技術的發展，人們可以根據人類的需求來改造生物的性狀，現已在許多領域取得可喜的成果．下圖示英

（1）擴增DNA的方法是PCR技術．
（2）圖中①表示基因表達載體的構建，該過程需要限制酶和DNA連接酶，根據題意，將目的基因導入乳腺組織中表達，所以目的基因前需要加入乳腺蛋白基因的啟動子．
（3）將目的基因導入動物受體細胞，常用顯微注射法，動物細胞工程的受體細胞常用受精卵，因為受精卵發育的全能性高，除此外也可用胚胎幹細胞．
（4）進行移植的胚胎需要培養到桑椹胚或囊胚階段，動物細胞培養的培養液中除各種營養外，還需要加入血清、血漿等天然成分．
（5）檢測蛋白質是否表達用抗原-抗體雜交技術．
（6）可通過胚胎分割技術、核移植技術克隆等技術手段增加個體數量，進行胚胎分割時，應選擇發育良好、形態正常的桑椹胚或囊胚．對囊胚階段的胚胎進行分割時要注意將內細胞團均等分割，否則會影響分割後胚胎的恢復和進一步發育．
故答案為：
（1）PCR
（2）基因表達載體的構建 限制酶和DNA連接酶 綿羊乳腺蛋白基因啟動子
（3）顯微注射法 受精卵發育的全能性最高 胚胎幹細胞
（4）桑椹胚或囊胚 動物血清
（5）抗原-抗體雜交
（6）細胞核移植技術進行克隆 將內細胞團均等分割

J. 馬保華的獲獎情況

01．奶山羊胚胎冷凍和移植試驗. 陝西省農牧業科學技術研究成果獎(二等，第2名)，1988。
02．山羊胚胎分割及同卵雙生試驗.陝西省農牧業科學技術研究成果獎(一等，第5名)，1988； 陝西省科技進步獎(二等，第5名)，1989
03．山羊胚胎移植技術研究. 湖南省教委科技進步獎(一等，第5名)，1993.6.
04．羊胚胎移植技術研究. 湖南省科技進步獎(四等，第5名)，1993.9.
05．國家「八五」重點科技攻關項目「生物技術實用化研究」專題，「安哥拉山羊胚胎冷凍與胚胎分割」子專題. 通過中國科學院應用研究與發展局組織的專家驗收，1996.6. (第2完成人)
06．山羊胚胎工程實用化研究.1998年度「西北農業大學康達爾科技開發獎」勵金，西北農業大學，深圳康達爾(高陵)飼料有限公司，1999.6. (一等，第1名)
07．波爾山羊胚胎工程產業化技術研究與示範. 四川省科技進步一等獎(第3名，項目完成人共19人)，2003
08．牛羊胚胎工程產業化技術研究. 安徽省科技進步一等獎(第2名，項目完成人共39人)，2004 01．山羊異體受精和體外受精的研究， 西北農業大學第八屆科學論文報告會優秀論文一等獎，1990.12.(第3名)
02．奶山羊精子體外獲能異體受精試驗，中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會優秀論文獎，1990.11.(第3名)
03．奶山羊胚胎一步冷凍試驗，中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會優秀論文獎，1992.7.(第3名)
04．奶山羊超排技術研究，中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會優秀論文獎，1994.10.(第2名)
05．抑制素主動免疫提高山羊排卵率.中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會優秀論文，1997.10(第2名)
06．PMSG及其抗血清對山羊的超排效果.中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會優秀論文，1997.10(第3名)
07．動物生殖調控(第一版).獲華東地區科技出版社第十二屆優秀科技圖書壹等獎，1999.8.22(參編，主編 王建辰)
08．羊生產性胚胎移植的組織與技術程序. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會第四屆會員代表大會暨第七次學術研討會優秀論文獎.2001.7，楊凌(第1名)
09．醋酸鉛對小鼠早期胚胎發育毒性的研究. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會第四屆會員代表大會暨第七次學術研討會優秀論文獎.2001.7，楊凌(第1名)
10．Aroclor 1254 對小鼠生殖毒理的研究. 中國畜牧獸醫學會全國獸醫毒理學與動物中毒病防治研討會優秀論文獎.2003.8，內蒙古阿拉善左旗(第1名)
11．實用型炔諾酮陰道栓主成分在綿羊體內釋放規律研究. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會第九屆和第二屆動物胚胎生物技術學術研討會優秀論文獎. 2003.10，安徽合肥(第1名)
12．波爾山羊超數排卵的研究. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會第九屆和第二屆動物胚胎生物技術學術研討會優秀論文獎. 2003.10，安徽合肥(第3名)
13．Aroclor 1254對小鼠早期胚胎體外發育毒性的研究. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會2007年學術研討會優秀論文獎. 2007.9，湖南長沙(通訊作者)
14．Aroclor 1254對顆粒細胞體外誘導分化為大黃體樣細胞影響的研究. 中國畜牧獸醫學會獸醫產科學分會2007年學術研討會優秀論文獎. 2007.9，湖南長沙(通訊作者) 01．2004年度「溢多利育人獎」，西北農林科技大學動物科技學院、廣東溢多利生物科技股份有限公司。
02．2005年學院優秀黨員。
03．2005年度學院優秀教師。