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mtt使用費用

發布時間:2021-06-22 02:55:16

㈠ 請問96孔板做MTT您怎麼做的不浪費板,每天鋪一次應該怎麼鋪呢

比如你要測1-3天的嘛 第一天鋪一個孔 平行樣的話就一組孔 第二天鋪再鋪一組 第三天再鋪一組 這樣到第四天你板上面不就有長了1-3天都有的細胞了嘛
如果不是要這樣連續測幾天的 那就用完一次後 把板子照紫外 然後再用別的孔 因為除了拿去測吸光度 板子不會受到多少污染 所以照了紫外可以繼續用

㈡ 請教一下 MT/7 MT/5 MTT24 二氧化碳滅火器 總重量多少謝謝

滅火器的總重量是滅火器鋼瓶的重量和滅火劑充裝量的和。MT/7、MT/5、MTT24隻顯示了二氧化碳額定充裝量,充裝量分別是7KG、5KG、24KG。並沒有滅火器鋼瓶的重量,因此,無法給出准確的重量。

國家標准GB/T 5099-1994《鋼質無縫氣瓶》對滅火器鋼瓶的材質、壁厚、壓力等參數進行了規定,對於重量方面,只對手提式滅火器的最大總質量進行了規定。因此,只要生產廠家生產的鋼瓶參數符合國標,充裝後總質量小於標准要求即可。

國家標准GB 4351.1-2005《手提式滅火器 第1部分:性能和結構要求》中要求,滅火器總質量不應大於20kg,其中二氧化碳滅火器總質量不應大於23kg(手提式滅火器)。

(2)mtt使用費用擴展閱讀:

二氧化碳滅火器使用方法

1、使用方法

先拔出保險銷,再壓合壓把,將噴嘴對准火焰根部噴射。

2、注意事項

使用時要盡量防止皮膚因直接接觸噴筒和噴射膠管而造成凍傷。撲救電器火災時, 如果電壓超過600伏, 切記要先切斷電源後再滅火。

3、應用范圍

適用於A、B、C類火災,不適用於金屬火災。撲救棉麻、紡織品火災時,應注意防止復燃。由於二氧化碳滅火器滅火後不留痕跡,因此適宜撲救家用電器火災。

A類火災指固體物質火災,如木料、布料、紙張、橡膠、塑料等燃燒形成的火災。

B類火災指液體火災和可溶化的固體物質火災,如可燃易燃液體和瀝青、石蠟等燃燒形成的火災。

C類火災指氣體火災,如煤氣、天然氣、甲烷、氫氣等燃燒形成的火災。

D類火災指金屬火災,如鉀、鈉、鎂等金屬燃燒形成的火災。

㈢ 財管睡前損益為什麼和成本沒關系

財管稅前損益為什麼和成本沒關系,因為成本是固定的
假設成本固定,那麼稅前就沒有損益
http://..com/link?url=_pkhSNaeoSfSJiXdk8-wB_Enrb9xsyWsX2YHATWv-Dy
如果是題目,這個簡答不錯

息稅前利潤=利潤總額+傳統利潤表中的「利息費用」
稅前經營利潤=利潤總額+管理用利潤表中的「利息費用」
管理用利潤表中的「利息費用」=傳統利潤表中的「利息費用」-金融資產投資收益-金融資產公允價值變動損益+金融資產減值損失
稅前經營利潤=息稅前利潤-金融資產投資收益-金融資產公允價值變動損益+金融資產減值損失
如果不存在金融資產投資收益、金融資產公允價值變動損益、金融資產減值損失,那麼稅前經營利潤是指EBIT。

㈣ 貼壁細胞毒性檢測用mtt mts,cck8哪種效果好

齊氏生物細胞生物學產品專家認為CCK8更好些,優點如下:

1)使用方便,省去了洗滌細胞,不需要放射性同位素和有機溶劑;

2)CCK-8法能快速檢測;

3)CCK-8法的檢測靈敏度很高,甚至可以測定較低細胞密度;

4)CCK-8法的重復性優於MTT 法;

5)CCK-8法對細胞毒性小;

6)CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液,毋需預制,即開即用。


當然,與MTT相比,CCK8有以下2點不足:

1)與MTT法相 比,CCK8和XTT的價格比較貴。

2)CCK8試劑的顏色為淡紅色,與含酚紅的培養基顏色接近,不注意的話容易產生漏加或多加。


為更好了解CCK8、MTT、XTT等檢測方法,齊氏生物細胞生物學產品專家制定下表,以供參考:

㈤ 德州撲克的錦標賽MTT獎金是不是大家的報名費坐滿就玩SUG也是嗎

覺得時間覺得世界多極化時代的好

㈥ MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒有哪些注意事項

M T T 可以被線粒體內的些脫氫酶還原生結晶狀的深紫色產物f o r m a Z a n。在特定溶訓存在的情況下,可以被完全溶解。然後通過琚杯儀可以測定490n m波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,則吸光度越高:細胞毒性越大,則吸光度越低使用說明:
1.收集對數期細胞,調整細胞懸浮液濃度,分於96孔構,每孔180u1,3000一10000細胞/孔。
2.置 37'C、 5%C O2 溫箱培養使細胞貼壁,培養 6-24 小時。
3.加入適當濃度的受試化合物,繼續培養適當時間。
4.小心吸去上清,加入90u1 新鮮培養液,再加入 10u1 M T T溶液,繼續培養 4 H。
5.然後吸掉上清,每孔加入 110u1 F o r m a z a n 溶液,置搖床上低速振盪 10 m i n,使結晶物充分溶解。在酶聯免疫柃測儀 490 n m 處測量各孔的吸光值。
6.同時設置調零孔(培養基、M TT、 F o r m a z a n溶解液),對照孔(細胞、相同濃度的葯物溶解介質、培養液、M T T、F orm az a n溶解液),每組設定 3 復孔。
注意事項
1.由於使用 96 孔板進行檢測,如果細胞培養時間較長,一定要注意蒸發的問題。一方面,由於 96 孔板周圍一圈最容易蒸發,可以採取棄用周圍一圈的辦法,改加 P B S,水或培養液,另一方面,可以把 96 孔板置於靠近培養箱內水源的地方,緩解蒸發
2.M T T 溶液方黃色需避光保存,長時間光照會導致失效。當顏色變為灰綠色時,請勿使用。F o r m az a n 溶解液結凍或產生沉澱時可以 37'C 水溶孵育以促進溶解,並且必須在全部溶解並混勻後使用。
3.為了您的安全和健康,請穿實驗服並戴一次性手套操作。
相關試劑:
12100 D M E M(H)
31800 R P Ml M Edi u m 1640
24800 通用細胞凍存液 S o1a r b i o
P1020 1x P B S , P H7. 2-7. 4 , 0.01M
H1020 H a n K s , 含鈣鎂, 含酚紅
T1300胰蛋白酶一 ED T A 消化液 (0.25%)不含酚紅
H1095 1M H e p e s 溶液 (P H7.2-7. 4,無菌)
P1400 青鏈黴素混合液(100x)

㈦ mtt的實驗方法

⒈選擇適當的細胞接種濃度。一般情況下,96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由於不同細胞貼壁後面積差異很大,因此,在進行MTT試驗前,要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間,以保證培養終止致細胞過滿。這樣,才能保證MTT結晶形成數量與細胞數呈的線性關系。否則細胞數太多敏感性降低,太少觀察不到差異。
⒉葯物濃度的設定。一定要多看文獻,參考別人的結果再定個比較大的范圍先初篩。根據自己初篩的結果縮小濃度和時間范圍再細篩。切記!否則,可能你用的時間和濃度根本不是葯物的有效濃度和時間。
⒊ 時間點的設定。在不同時間點的測定OD值,輸入excel表,最後得到不同時間點的抑制率變化情況,畫出變化的曲線,曲線什麼時候變得平坦了(到了平台期)那個時間點應該就是最好的時間點(因為這個時候的細胞增殖抑製表現的最明顯)。
⒋培養時間。200ul的培養液對於10的4~5次方的增殖期細胞來說,很難維持68h,如果營養不夠的話,細胞會由增殖期漸漸趨向G0期而趨於靜止,影響結果,我們是在48h換液的。
⒌MTT法只能測定細胞相對數和相對活力,不能測定細胞絕對數。做MTT時,盡量無菌操作,因為細菌也可以導致MTT比色OD值的升高。
⒍理論未必都是對的。要根據自己的實際情況調整。
⒎實驗時應設置調零孔,對照孔,加葯孔。調零孔加培養基、MTT、二甲基亞碸。對照孔和加葯孔都要加細胞、培養液、MTT、二甲基亞碸,不同的是對照孔加溶解葯物的介質,而加葯組加入不同濃度的葯物。
⒏避免血清干擾。用含15%胎牛血清培養液培養細胞時,高的血清物質會影響試驗孔的光吸收值。由於試驗本底增加,會試驗敏感性。因此,一般選小於10%胎牛血清的培養液進行。在呈色後,盡量吸凈培養孔內殘余培養液。 MTT 溶液的配製方法
通常,此法中的MTT 濃度為5mg/ml。因此,可以稱取MTT 0.5克,溶於100 ml的磷酸緩沖液(PBS)或無酚紅的培養基中,用0.22μm濾膜過濾以除去溶液里的細菌,放4℃ 避光保存即可。在配製和保存的過程中,容器最好用鋁箔紙包住。
需要注意的是,MTT法只能用來檢測細胞相對數和相對活力,但不能測定細胞絕對數。在用酶標儀檢測結果的時候,為了保證實驗結果的線性,MTT 吸光度最好在0-0.7 范圍內。
MTT一般最好現用現配,過濾後4℃避光保存兩周內有效,或配製成5mg/ml保存在-20度長期保存,避免反復凍融,最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解。我一般都把MTT粉分裝在EP管里,用的時候現配,直接往培養板中加,沒必要一下子配那麼多,尤其當MTT變為灰綠色時就絕對不能再用了。
MTT有致癌性,用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌,MTT對菌很敏感;往96孔板加時不避光也沒有關系,畢竟時間較短,或者你不放心的時候可以把操作台上的照明燈關掉.
配製MTT時用用PBS溶解,也有人用生理鹽水配,60℃水浴助溶。
PBS配方:
Nacl 8g
Kcl 0.2g
Na2HPO4 1.44g
KH2PO4 0.24g
調pH 7.4
定容1L 1、收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔,(邊緣孔用無菌PBS填充)。
⒉、5%CO2,37℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板),加入濃度梯度的葯物,原則上,細胞貼壁後即可加葯,或兩小時,或半天時間,但我們常在前一天下午鋪板,次日上午加葯.一般5-7個梯度,每孔100ul,設3-5個復孔.建議設5個,否則難以反應真實情況。
⒊、5%CO2,37℃孵育16-48小時,倒置顯微鏡下觀察。
4、每孔加入20ulMTT溶液(5mg/ml,即0.5%MTT),繼續培養4h。若葯物與MTT能夠反應,可先離心後棄去培養液,小心用PBS沖2-3遍後,再加入含MTT的培養液。
5、終止培養,小心吸去孔內培養液。
6、每孔加入150ul二甲基亞碸,置搖床上低速振盪10min,使結晶物臢(Zā)充分溶解。在酶聯免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值。
7、同時設置調零孔(培養基、MTT、二甲基亞碸),對照孔(細胞、相同濃度的葯物溶解介質、培養液、MTT、二甲基亞碸)。 1、收集對數期細胞,調節細胞懸液濃度1×106/ml,按次序將①補足的1640(無血清)培養基40ul ;②加Actinomycin D(有毒性)10ul用培養液稀釋 (儲存液100mg/ml,需預試尋找最佳稀釋度,1:10-1:20);③需檢測物10ul;④細胞懸液50ul(即5×104cell/孔),共100ul加入到96孔板(邊緣孔用無菌水填充)。每板設對照(加100ml 1640)。
2、置37℃,5%CO2孵育16-48小時,倒置顯微鏡下觀察。
3、每孔加入10 ul MTT溶液(5 mg/ml,即0.5%MTT),繼續培養4 h。(懸浮細胞推薦使用WST-1,培養4 h後可跳過步驟4,直接酶聯免疫檢測儀OD570nm(630nm校準)測量各孔的吸光值)。
4、離心(1000轉x10min),小心吸掉上清,每孔加入100 ul二甲基亞碸,置搖床上低速振盪10 min,使結晶物充分溶解。在酶聯免疫檢測儀OD570nm(630nm校準)測量各孔的吸光值。 細胞過了30代以後就不要用了,因為狀態不好了;培養板要用好的(最好進口板),不好的板或重復利用的板只可做預實驗。
接種時最好按照預實驗摸索出的密度接種,因為細胞密度在10000/ml左右時,所測得的OD值的區間即細胞抑制率(或者增值率)的所呈現的線性關系最好,結果最可信。如果鋪的太稀細胞的殺傷不會很明顯,太密細胞可能都會凋亡,因為細胞長的太快營養會不夠,最後導致死亡。且而細胞過密或者過少,增殖都會過快或者過慢,其增值率線性關系不佳。故而MTT細胞密度多採用10000/ml,100ul/孔。
細胞密度要根據不同細胞的特點來定。如果你做的葯品對細胞具有刺激作用那麼取小點的細胞濃度,如果你做的葯品對細胞具有抑製作用那麼取大點的細胞濃度,這樣與對照的區別更明顯,數據更好。懸浮細胞每孔的細胞數可達到105,貼壁細胞可為103-104。
其它的聲音
⒈首先細胞的接種密度一定不能過大,一般每孔1000個左右就夠了,我認為寧少勿多。尤其是對於腫瘤細胞。10000/孔是太高了,這樣即使葯物有作用,MTT方法也是表現不出的,最佳點板濃度在4000-5000/孔,太少的話SD值會很大。(對於不同的細胞,每孔細胞數要摸索一下,對照組OD在1.4以下為佳,當然通常來說更不要超過2。)
⒉MTT本身就是比較粗的實驗,增殖率10%左右的波動都不算奇怪。特別是新手,20%的波動也是常見的,所以很可能是技術原因引起的,特別是種板技術一定要過關。
⒊我做的是腫瘤細胞的MTT實驗,這種細胞長的很快一開始我是用100000/ML的濃度來接種的,結果細胞長的太滿結果是沒有梯度也沒有線性關系。後來調整濃度,用過40000~80000/ML的濃度都做過MTT實驗,結果發現做的結果比較好點的是60000~70000/ML的濃度組的。用40000/M的濃度的組,由於細胞少,葯物作用的梯度還是有,只是沒有很好的線性關系。還有根據細胞生長速度以及葯物的特性(有時間依賴性和濃度依賴性的葯物)來確定培養時間是48小時還是72小時。
注意細胞懸液一定要混勻,以避免細胞沉澱下來,導致每孔中的細胞數量不等,可以每接幾個就要再混勻一下。加樣器操作要熟練,盡量避免人為誤差。雖然移液器比移液管精確得多,但是如果操作不熟,CV會在8%左右。另外,吹散次數過多也會影響細胞活力。所以要熟練些、快些上板。

㈧ 15億金幣獎池的mtt賽,需要多少萬金幣的報名費

- -12小時不斷很難算啊 平常日常匹配一盤大概60 70金幣一盤算三倍就180+了 而且12小時能打幾盤誰都算不出來··· 皮膚很難說 反正數量肯定不少··。

㈨ 電信回復mttx是否可以免費提醒流量

尊敬的用戶您好
希望下面的回答能夠對您有所幫助。
針對手機上網用戶,在入網時已提供免費手機上網流量提醒服務,主要包括:
(一)定期提醒。每月一般在6號或7號、16號或17號分兩次發送;
(二)閥值提醒。當客戶當月手機上網流量達到套餐內所包含流量的80%時發送;
(三)超量提醒。當客戶當月手機上網流量達到套餐內所包含流量的100%、200%至500%時分別發送,對於流量超出500%的客戶,還將在當月賬單中進行提示;
(四)關懷提醒。每月21號或22號,對於使用不足80%的用戶進行提醒。 以上提醒均為免費提供,若客戶不需要上述提醒,可通安徽電信網上營業廳、安徽電信掌上營業廳、各自有營業廳、10000進行訂購、取消。

㈩ 使用mtt法怎麼繪制生長曲線怎麼計算

其中包含可以用來為某一范圍內的活動及其結果制定規則檢測標准中都包含檢測方法。
檢測標准就是一種以文件形式發布的統一協定,其目的是確保檢測出的數據能夠符合需要、導則或特性定義的技術規范或者其他精確准則。
檢測標准、過程。
檢測方法就是對特定的檢測物進行試驗、步驟,依據科學的原理,確定出的試驗內容、方式、計算分析等實現需要得出的數據和結果的具體手段和辦法、檢測方法都是隨著科技的不斷發展不斷的更新,但檢測結果要符合檢測標准來判定,但是檢測方法有些是超前於檢測標准中所規定的

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