免疫電鏡使用費用

A. 什麼是免疫電鏡技術

免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即採用抗原抗體凝集反應後，再經負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術。該項技術是利用帶有特殊標記的抗體與相應抗原相結合，在電子顯微鏡下觀察，由於標准物形成一定的電子密度而指示出相應抗原所在的部位。免疫電鏡的應用，使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細胞的水平。其中免疫鐵蛋白技術，免疫膠體金技術，免疫酶細胞化學技術等，皆為常用技術。

B. 免疫電鏡的原理

該項技術是利用帶有特殊標記的抗體與相應抗原相結合，在電子顯微鏡下觀察，由於標准物形成一定的電子密度而指示出相應抗原所在的部位。
根據標記方法的不同， 分為免疫鐵蛋白技術、免疫酶標技術和免疫膠體金技術。如免疫鐵蛋白技術是將含鐵蛋白通過一種低分子量的雙功能試劑與抗體結合，成為一種雙分子復合物，它既保留抗體的免疫活性，又具有電鏡下可見的高電子密度鐵離子核心，因此用鐵蛋白標記的抗體可通過電鏡免疫化學的方法在電鏡下定位細胞中的抗原。

C. 包埋前 包埋後免疫電鏡 哪個好

成像原理 1．透射電鏡技術透射電鏡是以電子束透過樣品經過聚焦與放大後所產生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察.透射電鏡的解析度為0.0.2nm,放大倍數為幾萬～幾十萬倍.由於電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備更薄的超薄切片（通常為50～100nm）.其制備過程與石蠟切片相似,但要求極嚴格.要在機體死亡後的數分鍾釣取材,組織塊要小(1立方毫米以內）,常用戊二醛和餓酸進行雙重固定樹脂包埋,用特製的超薄切片機（ultramicrotome）切成超薄切片,再經醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色.電子束投射到樣品時,可隨組織構成成分的密度不同而發生相應的電子發射,如電子束投射到質量大的結構時,電子被散射的多,因此投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電子照片上則呈黑色,稱電子密度高（electrondense）.反之,則稱為電子密度低（electronlucent）. 2．掃描電鏡技術掃描電鏡是用極細的電子束在樣品表面掃描,將產生的二次電子用特製的探測器收集,形成電信號運送到顯像管,在熒光屏上顯示物體.（細胞、組織）表面的立體構像,可攝製成照片. 掃描電鏡樣品用戊二醛和餓酸等固定,經脫水和臨界點乾燥後,再於樣品表面噴鍍薄層金膜,以增加二波電子數. 電子顯微鏡下的纖維掃描電鏡能觀察較大的組織表面結構,由於它的景深長,1mm左右的凹凸不平面能清所成像,故放樣品圖像富有立體感.

D. 免疫電鏡的影響免疫電鏡的一些因素

1．標記物 用於電鏡觀察的標記物有三類：一類是電子密度緻密的標記物，如鐵蛋白、辣根過氧化物酶等。另一類則是放射性同位素，如I、S、P、C、H等，第三類則是有獨特形狀的標記物，如血蘭蛋白、噬菌體等。對標記物的要求是：具有特定的形狀、不影響抗原抗體復合物的特性與形狀。目前用於免疫電鏡的標記物主要是鐵蛋白和HRP。兩者各有其優點，鐵蛋白電子密度緻密。觀察時反差大，優於酶標記，但鐵蛋白分子量大(460 000)，穿透能力差，所以適於細胞表面抗原的定位，另外鐵蛋白的標記過程比較復雜。HRP分子量小(40 000)，穿透力強，有利於標記抗體進入細胞內，適於細胞內的抗原定位。
2．固定劑 固定是免疫電鏡較關鍵的一步，免疫電鏡中的固定與一般超薄切片中的固定的不同之點在於既考慮保存細胞的超微結構,又要考慮到抗原的失活性問題。
（1）固定劑的要求：①不損害細胞內抗原的活性；②固定速度快、效果好；③分子量小，易於滲透；④固定後,不引起交聯，造成空間的阻礙，影響標記抗體進入抗原位。
（2）影響固定的因素有：①採用固定劑的種類；②固定劑的濃度，濃度過大，對抗原的活性有影響，濃度過小，固定效果差；③固定劑的pH；④固定劑的溫度,一般採用2℃～4℃冷固定；這樣能降低細胞的自浴作用和水分的抽提；⑤固定時間與溫度有關，溫度高，固定快，也與緩沖系的離子強度有關，離子強度大，滲透壓大，穿透力強，固定要快。不同的固定劑，或同一固定劑的不同濃度所需的固定時間也不一致；⑥與被固定的細胞類型有關。目前常用的固定系統有：4%聚甲醛，1.5%～2%戊二醛，1%多聚甲醛+1%戊二醛，4%多聚甲醛+0.5%苦味酸+0.25%戊二醛，96%乙醇+1%醋酸。不論採用哪些系統，使用前必須用已知效價的抗原做一系列預實驗。如固定劑的種類濃度、溫度、pH及固定時間等。然後做出預處理的效價，作為失活參考以再選擇最適條件。
例如由於某些固定技術（如鋨酸固定）對抗體抗原的結合有干擾，因此應採取較為溫和的樣品制備方法。
3．非特異性吸附 非特異性吸附與酶標抗體、抗血清的稀釋度、染色時間，溫度及介質等有關，其中最主要的是抗血清及標記抗體的稀釋。一般認為高效價抗血清或標記抗體稀釋到低蛋白濃度，用於標記染色可獲得最理想的結果。因為低蛋白濃度有利於降低非特異性吸附。實際應用的蛋白濃度大致在0.50mg/ml～2mg/ml。工作效價一般在1︰20～1︰400,在實際工作中，將標記抗體或抗血清稀釋到1︰100倍以上則可獲得理想的陽性結果，而非特異性吸附必然降得很低。工作濃度的選擇是將標記抗體或抗血清作1︰2、1︰4、1︰8……1︰256的稀釋，做已知陽性標本的標記染色觀察，取其陽性沉積物明顯，而非特異性吸附最低的一稀釋度做為工作濃度。4．標記染色法 標記染色法分為直接染色法與間接染色法兩種。前者的特點是特異性較高,敏感性低，標記抗體只能用於檢測一種抗原。後者敏感性較強，一種標記抗體可用於多種抗原的檢測。缺點是特異性較差。

E. 司法鑒定收費標准

導讀：司法鑒定是某些案件必不可少的一個環節，司法鑒定要到專門的鑒定機構，司法鑒定主要是法醫類鑒定，司法鑒定收費項目和收費標準是什麼呢?下面小編整理了相關內容，詳情請看下文。

(五) 法醫人類學鑒定

60 -像重合鑒定 例 1200

61 -像面貌畫像 例 1000

62 -像面貌塑像 例 500

63 屍骨個體識別 例 1000

64 人類學骨齡鑒定 例 1000

65 法醫人類學鑒定文證審查 例 500 (六) 法醫精 神病鑒定

66 精神狀態鑒定 例 600 包括智能障礙評定、精神疾病醫學診斷等

67 刑事能力評定 例 1500 包括責任能力、服刑能力、性自衛能力等

68 民事能力評定 例 1500 包括民事行為能力、勞動能力等

69 訴訟能力評定 例 1000 包括受審能力、作證能力、訴訟行為能力等

70 司法精神病因果關系鑒定 例 2000 包括精神損失、精神傷殘評定、精神傷病關系鑒定等

71 多導心理生理檢測評定 例 2000

72 法醫精神病鑒定文證審查 例 1000

註：「法醫病理鑒定」中的(二)「法醫臨床鑒定」和(六)「法醫精神病鑒定」需要進行醫學輔助檢查的，檢查收費標准按照當地價格主管部門制定的相應醫療服務收費標准另行收取費用。

二、物證類類別

序號 收費項目 單位 基準價(元) 備注

(一) 文書鑒定

1 筆跡鑒定 項 1000

2 印章印文鑒定 項 1000

3 印刷文件同一性、同源性鑒定 項 1200

4 文件製作方法鑒定 件 1200

5 印刷機具鑒定 件 1200

6 文書形成時間鑒定 項 2200

7 朱墨或文字時序鑒定 項 2200

8 變造文件鑒定 項 1200

9 污損文件鑒定 項 1200

10 證件、證書、票據真偽鑒定 件 1200

11 字跡壓痕顯現 件 1000

12 文書物質材料鑒定 項 1000

13 文書鑒定文證審查 例 800

涉及財產案件，標的額不超過10萬元的，按照本表左側所例收費標准執行;標的額在10萬元以上的，按照本辦法第八條規定執行。

(二) 痕跡 鑒定

14 手印鑒定 枚 800 涉及財產案件，收費辦法同上。 痕跡鑒定均以檢材數量為單位基數，不計樣本數量

15 足跡鑒定 枚 680 痕跡鑒定均以檢材數量為單位基數，不計樣本數量

16 工具痕跡鑒定 個 850 同上

17 彈頭彈殼痕跡鑒定 枚 880 同上

18 槍支性能及致傷力鑒定 支 1000 同上

19 彈道分析鑒定 例 1000 同上

20 槍彈檢驗建檔 支 200 同上

21 動物蹄跡痕跡鑒定 枚 780 同上

22 整體分離痕跡鑒定 件 630 同上

23 鑰匙痕跡鑒定 件 640 同上

24 紡織品痕跡鑒定 件 650 同上

25 玻璃破碎痕跡鑒定 件 650 同上

26 牙齒痕跡鑒定 件 850 同上

27 唇紋痕跡鑒定 個 650 同上

28 皮膚紋痕跡鑒定 個 850 同上

29 耳廓痕跡鑒定 個 650 同上

30 車輛輪跡鑒定 個 850 同上

31 車輛痕跡鑒定 輛 1000 同上

32 機動車輛號碼化學顯現 組 380 同上

33 痕跡顯現 件 400 同上

34 實物照片與實物同一鑒定 件 600 同上

35 物體爆破(裂)痕跡鑒定 件 1000 同上

36 常見炸葯鑒定 項 1000 同上

37 導火索、導爆索鑒定 段 800 同上

38 火雷管、電雷管鑒定 段 1000 同上

39 制式手榴彈、手雷鑒定 項 800 同上

40 爆炸裝置鑒定 項 2000 同上

41 痕跡鑒定文證審查 例 800

42 掃描電鏡/x射線能譜儀成分檢驗(定性) 樣本 460

43 掃描電鏡/x射線能譜儀比對檢驗 組 1000

(三) 微量物證理化檢驗鑒定

44 射擊、爆炸殘留物的掃描電鏡/x射線能譜儀成分檢驗 樣本 1200

45 傅立葉(顯微)顯微紅外光 譜儀成分檢驗 樣本 350

46 傅立葉(顯微)顯微紅外光 譜儀成分比對檢驗 組 650

47 偏振光顯微鏡檢驗 樣本 200

48 薄層色譜檢驗 樣本 200

49 拉曼(激光)光譜儀檢驗 樣本 400

50 (激光)等離子發射光譜儀/質譜儀成分檢驗 樣本 700 超過5個元素的，每增加一個元素加收100元

51 (激光)等離子發射光譜儀/ 質譜儀成分比對檢驗 元素 300 需定量檢驗，每元素加收50%

52 氣相色譜/質譜儀檢驗 樣本 400 需定量檢驗，每樣本·目標物加收50%

53 裂解-氣相色譜/質譜儀檢驗 樣本 350 同上

54 氣相色譜檢驗 樣本 300 同上

55 熱差、熱重儀檢驗 樣本 300 同上

56 X射線熒光光譜儀檢驗 樣本 350 同上

57 X射線衍射儀檢驗 樣本 400 同上

58 離子色譜或離子色譜/質譜儀檢驗 樣本 350 同上

59 微量物證理化檢驗鑒定文證審查 例 800

三、聲像資料類類別

序號 收費項目 單位 基準價(元) 備注

(一) 電子數 據鑒定

1 硬碟檢驗 GB 20 包括台式機硬碟、筆記本硬碟、移動硬碟

2 伺服器檢驗 GB 30 包括磁碟陣例櫃、網路硬碟等

3 CD及DVD光碟檢測鑒定 片 200

4 U盤及存儲卡檢測鑒定 個 300 含SIM卡

5 軟盤檢測鑒定 張 100

6 電子設備檢驗鑒定 個 600 包括錄音筆、傳真機、電子秤等同類電子設備

7 存儲介質物理故障排除 部件 900 包括調換磁頭、電機;更換PCB板;壞扇處理等

8 手機機身檢驗 個 900

9 注冊表檢驗鑒定 個 1000

10 軟體一致性檢驗鑒定 100個程 序行 120

11 軟體功能檢驗 個 1500 按每個檢驗的軟體收費

12 文件一致性檢驗鑒定 對 800

13 資料庫數據恢復 個 3500

14 資料庫一致性檢驗鑒定 對 4200

15 其他電子數據檢驗鑒定 MB 5 包括網路數據包等

16 密碼破解 個 1500

17 現場數據獲取 GB 8

18 網路數據獲取 接入小時 260

19 光碟朔源檢驗 片 600

20 光碟刻錄機檢驗 片 800

21 電子物證鑒定文證復審 例 1200

(二) 聲像資 料鑒定

22 錄音資料中話者同一認定 人 2200

23 錄音資料辨識 件 1200 按每20分鍾計收

24 錄音資料的真實性完整性鑒定 件 2000 按每20分鍾計收

25 錄音資料的降噪處理 件 1800 按每20分鍾計收

26 語音分析檢驗 件 800 按每20分鍾計收

27 錄音器材檢驗 件 600

28 錄像資料同一性認定 件 2200

29 錄像資料辨識 件 900

30 錄像資料的真實性完整性鑒定 件 1500 按每20分鍾計收

31 錄像資料的模糊圖像處理 件 1800

32 圖片資料同一性認定 件 1800

33 圖片資料辨識 件 800

34 圖片資料的真實性完整性鑒定 件 1500

35 圖片資料的模糊圖像處理 件 1000

36 人像鑒定 件 800

37 特種光學技術檢驗 件 500

38 多(超)光譜檢驗 件 800

39 計算機人像組合 件 500

40 手工模擬畫像 件 800

41 手工雕塑復原頭像 件 2000

42 計算機模擬復原頭像 件 1000

43 聲像資料鑒定文證復審 件 1200

F. 免疫熒光和免疫電鏡有何異同

標記原理相同，標記物不同，觀察方法不同。

G. 免疫電鏡技術的常用方法有哪些

在電鏡下直接觀察抗原和抗體的結合反應，稱為免疫吸附電鏡或免疫電鏡技術。它具有準確、快速、靈敏度高和操作簡便等優點，在抗血清效價很低時仍有較明顯的反應。免疫電鏡技術有下列常用的方法。

1 誘捕法

（1）包被抗血清 銅網膜面覆於抗血清液滴上（抗血清的稀釋度應先試驗確定），5～10min，反應時加蓋，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（3）包被檢測樣品 銅網膜覆於病組織浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（5）負染 用2%醋酸雙氧鈾負染數秒，吸干。

（6）電鏡觀察 凡抗原和抗體有反應，則在銅網膜上能捕獲到較多的粒體。可以提高病毒檢測效率10～100倍。本法適宜各種形狀的病毒粒體。

2 修飾法

（1）包被抗血清 銅網膜面覆於抗血清液滴上（抗血清的稀釋度應先試驗確定），5～10min，反應時加蓋，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（3）包被檢測樣品 銅網膜覆於病組織浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（5）銅網膜再置抗血清中[比（1）所用抗血清濃度約高50～100倍]10min。

（6）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（7）負染 用2%醋酸雙氧鈾負染數秒，吸干。

（8）電鏡觀察 凡抗原和抗血清呈陽性反應的，病毒粒體比一般浸漬法多，病毒粒體表面布滿抗體分子，使粒體體積變大，適用於觀察除球狀以外的病毒。

3 A-蛋白的修飾法

本法適宜於抗血清效價較低，用一般修飾法又難以判斷結果的。由於抗體上又結合A-蛋白，使粒體外的「外套」加厚，便於判斷。比誘捕法提高檢測效率1～2倍。步驟如下：

（1）包被抗血清 銅網膜面覆於抗血清液滴上（抗血清的稀釋度應先試驗確定），5～10min，反應時加蓋，以防抗血清滴蒸干。

（2）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（3）包被檢測樣品 銅網膜覆於病組織浸出液滴中10min，吸干。

（4）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（5）蘸取20%A-蛋白液，吸干。

（6）洗滌 用10～30滴蒸餾水滴沖洗銅網膜，濾紙吸干。

（7）負染 用2%醋酸雙氧鈾負染數秒，吸干。

（8）電鏡觀察。

H. 什麼時候使用免疫熒光技術，什麼時候應該使用免疫電鏡，有何區別

檢測水平不一樣 免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即採用抗原抗體凝集反應後，再經負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術。免疫電鏡的應用，使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細胞的水平。 而免疫熒光技術將免疫學方法(抗原抗體特異結合)與熒游標記技術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。由於熒光素所發的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，從而可對抗原進行細胞定位。
前者屬於主動發現 實驗重要時可以使用 後者屬於被動發現 一般實驗都可以滿足

I. 免疫熒光和免疫電鏡有何異同

使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細胞的水平。 而免疫熒光技術將免疫學方法(抗原抗體特異結合)與熒游標記技術結合起來研究特異蛋白抗原在細胞內分布的方法。它主要分為兩大類，從而可對抗原進行細胞定位：一類是免疫凝集電鏡技術；另一類則是免疫電鏡定位技術，再經負染色直接在電鏡下觀察，即採用抗原抗體凝集反應後。由於熒光素所發的熒光可在熒光顯微鏡下檢出，是在超微結構水平研究和觀察抗原檢測水平不一樣 免疫電鏡技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物、抗體結合定位的一種方法學。免疫電鏡的應用

J. 免疫電鏡的介紹

免疫電鏡(immunoelectron micros)技術是免疫化學技術與電鏡技術結合的產物，是在超微結構水平研究和觀察抗原、抗體結合定位的一種方法學。它主要分為兩大類：一類是免疫凝集電鏡技術，即採用抗原抗體凝集反應後，再經負染色直接在電鏡下觀察；另一類則是免疫電鏡定位技術。免疫電鏡的應用，使得抗原和抗體定位的研究進入到亞細胞的水平。