A. 裂解液ripa加少了會有什麼影響
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用於常規的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio Immunoprecipitation Assay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。關於不同的RIPA裂解液以及我們生產的其它裂解液的主要特點和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。
RIPA裂解液(強)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1%TritonX-100,1% sodium deoxycholate,0.1% SDS,以及2mM sodium pyrophosphate,25mM β-glycerophosphate,1mM EDTA,1mM Na3VO4,0.5 ug/ml leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
RIPA裂解液(中)的主要成分為50mM Tris(pH 7.4),150mM NaCl,1% NP-40,0.5% sodium deoxycholate。
B. 俠盜飛車5秘籍大全
《俠盜飛車5》比較常用的秘籍有:醉酒模式LIQUOR1-999-547-861;
爆炸+近戰攻擊HOTHANDS1-999-4684-2637;
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燃燒+武器彈葯INCENDIARY1-999-462-363-4279;
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技能冷卻完成POWERUP1-999-769-3787;
從空中跳下SKYFALL1-999-759-3255。
C. 艾滋病哪些方法能查出
我是這方面的專業人員,按照《全國艾滋病檢測技術規范》(2004)
5.1.2 篩查方法
5.1.2.1 常用的篩查方法是酶聯免疫試驗(ELISA)
目前國內外主要使用第三代(雙抗原夾心法)試劑,少數使用第二代試劑。血源篩查仍以第三代ELISA為主,國際上有些國家和地區已將線性免疫酶測定(第四代ELISA試劑)用於血源篩查。第四代ELISA試劑是最近發展起來的HIV抗原抗體聯合測定試劑,可同時檢測P24抗原和抗HIV-1/2抗體。與第三代抗HIV-1/2試劑相比,檢出時間提前了4~9.1d。其優點在於能同時檢測抗原抗體,降低血源篩查的殘余危險度。
5.1.2.2 快速檢測(RT)及其它檢測
隨著對HIV感染者和AIDS病人抗逆轉錄病毒治療的進展,及對無症狀HIV感染者提供自願咨詢檢測(VCT)的迫切需求,簡便、快速的HIV檢測方法被廣泛應用。常用的主要有以下幾種:
(1)明膠顆粒凝集試驗(PA):PA是HIV血清抗體檢測的一種簡便方法,是將HIV抗原致敏明膠顆粒作為載體,與待檢樣品作用,混勻後保溫(一般為室溫)。當待檢樣品含有HIV抗體時,經抗原致敏的明膠顆粒與抗體發生抗原-抗體反應,根據明膠顆粒在孔中的凝集情況判讀結果。PA試劑有兩種,HIV-1和HIV-2抗原共同致敏的PA試劑(AFD HIV-1/2 PA),已經我國食品葯品監督管理局(SFDA)注冊批准;HIV-1、HIV-2抗原分別致敏的PA試劑(SERODIA-HIV-1/2)可初步區分HIV-1型和HIV-2型,目前我國尚未引進。
(2)斑點EIA或稱斑點ELISA(dot-EIA):以硝酸纖維膜為載體,將HIV抗原滴在膜上成點狀,即為固相抗原。加血清樣品作用,以後步驟同ELISA。陽性結果在膜上抗原部位顯示出有色斑點。反應時間在10 min以內,使用抗原量少。
(3)斑點免疫膠體金(或膠體硒)快速試驗:與斑點EIA相似,也是以硝酸纖維膜為載體。區別在於不用酶標記抗體,而代之以紅色的膠體金(或膠體硒)A蛋白,用滲濾法作為洗滌方法。試劑穩定,可室溫長期保存。試驗時不需任何設備,迅速、簡便、特異性較好,敏感性約相當於中度敏感的ELISA,適用於應急檢測、門診急診個體檢測。目前已有在國內被SFDA批准注冊的國外進口試劑和國內產品。一般可在1030min內判讀結果。
(4)艾滋病唾液檢測卡:在硝酸纖維膜上包被人工合成的HIVgp41/gp36蛋白抗原,可同時檢測含在唾液中的HIV-1/HIV-2抗體,原理為酶免疫間接法。主要檢測唾液中的HIV IgA與IgG抗體,敏感性特異性與ELISA相近,可避免靜脈穿刺。但樣品預處理時間長且售價較高。以唾液為樣品測定HIV抗體的ELISA、免疫印跡法(WB)試劑已經美國FDA批准。
(5)其它快速篩查試驗方法:家庭HIV檢測(Home Access System)等。
5.1.2.3 尿液HIV抗體檢測
1996年美國FDA首次批准HIV-1尿液ELISA試劑,我國也正在研製尿液HIV抗體檢測試劑。主要適用於靜脈注射毒品(IDUs)人群和其它高危人群的大面積流行病學調查、監測。篩查陽性者仍需采血做確認試驗才能確定。
5.1.3 篩查試驗
根據檢測目的選用符合要求的篩查試劑對樣品進行初篩和重復檢測(復檢)。
5.1.3.1 初篩試驗:以第三代ELISA(雙抗原夾心法)為例。
(1)實驗准備:試驗開始前將試劑和樣品放置在室溫(1823℃), 按實驗室SOP做好試劑准備。
磷酸鹽緩沖液:若液體內有結晶,應放置在37℃直至溶解,用蒸餾水1:25稀釋濃縮液,4℃保存2周。
TMB底物液:使用前配製,TMB液和過氧化脲液等量混勻。
1M硫酸終止液:85 ml蒸餾水中加入5 ml濃硫酸。
備好試劑盒、待檢樣品和外部對照質控血清後,按試劑盒說明書以及質控和安全防護要求進行篩查檢測。
(2)實驗操作
①裝好所需使用數目的孔條,每孔均加入100μl樣品稀釋液。設3個陰性對照孔,1個HIV-1陽性對照孔,若需要可再設1個HIV-2陽性對照孔。
②每孔加入50μl待檢樣品及對照(對照要後加),未用孔用樣品稀釋液加滿以溶解結合物球,以免堵塞洗板機孔。可震搖15S,37±2℃孵育60±5min。
③置洗板機上洗滌6遍(用洗液將反應孔完全加滿,靜置3060S,共洗滌6遍,洗完後孔上方及底部不應殘存液體,禁止在濾紙上拍干)。
④每孔加入100μl底物液,勿攪動,室溫避光孵育30±2min。
⑤每孔加入100μl 1M硫酸終止反應,充分混勻。
⑥在2h內置於酶標儀讀數,單波長450nm,或雙波長450/630nm測OD值。
(3)實驗結果
①陰性對照(NC),HIV-1陽性對照(PC1),HIV-2陽性對照(PC2)
NC 必須<0.25方可用,排除NC≥0.25的值,計算NC平均值。
NC界限范圍:0.6倍NC均值<NC<1.4倍NC均值。
②符合以下條件的實驗成立:
兩個以上的NC可用。
PC1-NC均值 ≥ 0.4,PC2-NC均值 ≥ 0.4
③Cut off值 = 陰性對照均值 + 0.100
小於Cut off為陰性,大於或等於Cut off為陽性
(4)報告:對呈陰性反應的樣品,可由實施檢測的實驗室出具HIV抗體陰性報告;對呈陽性反應的樣品,須進行復檢,不能出陽性報告。
5.1.3.2 復檢試驗:對初篩呈陽性反應的樣品用原有試劑和另外一種不同原理或不同廠家的篩查試劑重復檢測。如兩種試劑復測均呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性;如均呈陽性反應,或一陰一陽,需送艾滋病確認實驗室進行確認
5.1.4 初篩試驗結果的報告
對HIV抗體篩查試驗,呈陰性反應者可出具「HIV抗體陰性」報告(可用附表1);對初篩試驗呈陽性反應者不能出陽性報告,可出具「HIV抗體待復查」報告(附表1)。
5.1.5 初篩試驗呈陽性反應樣品的轉送
如需送上級實驗室進行復測或確認,需要填寫「HIV抗體復測送檢單」(附表2),經1名檢驗人員和1名具有中級以上技術職稱的人員審核簽字。送當地艾滋病篩查中心實驗室,再轉送艾滋病確認實驗室,或在本實驗室復檢後直接送確認實驗室。
5.1.6 對篩查陰性和陽性者,均需做好檢測後咨詢。
5.2 HIV抗體確認試驗
5.2.1 確認試驗的試劑
必須是經國家食品葯品監督管理局注冊批准、在有效期內的試劑。
5.2.2 確認試驗方法
包括免疫印跡試驗(WB)、條帶免疫試驗(LIATEK HIVⅢ)、放射免疫沉澱試驗(RIPA)及免疫熒光試驗(IFA)。國內常用的確認試驗方法是WB。
5.2.3 確認檢測流程
有HIV-1/2混合型和單一的HIV-1或HIV-2型。先用HIV-1/2混合型試劑進行檢測,如果呈陰性反應,則報告HIV抗體陰性;如果呈陽性反應,則報告HIV-1抗體陽性;如果不滿足陽性標准,則判為HIV抗體檢測結果不確定。如果出現HIV-2型的特異性指示條帶,需用HIV-2型免疫印跡試劑再做HIV-2的抗體確認試驗,呈陰性反應,報告HIV-2抗體陰性;呈陽性反應則報告HIV-2抗體血清學陽性,並將樣品送國家參比實驗室進行核酸序列分析
5.2.5 確認試驗結果的判定
下面是我國使用WB確認HIV感染的判定標准和判定結果的基本原則。在實際工作中還應參照所用試劑盒說明書綜合判定,遇疑難情況應報上級實驗室解決。
5.2.5.1 HIV-1抗體陽性(+)
至少有2條env帶(gp41和gp160/gp120)出現,或至少1條env帶和p24帶同時出現。
5.2.5.2 HIV-2抗體血清學陽性(+)
同時符合以下2條標准可判為HIV-2抗體血清學陽性:
(1)符合WHO陽性判定標准,即出現至少2條env帶(gp36和gp140/ gp105)。
(2)符合試劑盒提供的陽性判定標准。
5.2.5.3 HIV抗體陰性(-)
無HIV抗體特異帶出現。
5.2.5.4 HIV抗體不確定(±)
出現HIV抗體特異帶,但不足以判定陽性。
註:①HIV-1抗體特異帶包括:env帶:gp160/gp120、gp41;gag帶:p55、p24、p17(或p18);pol帶:p66(或p65)、p51、p31。②HIV-2抗體特異條帶包括:env帶:gp140/gp105、gp36;gag帶:p56、p26、p16;pol帶:p68、p53、p34。(由於使用的毒株不同,HIV-2 env帶也可為gp125/gp80、gp36)。
5.2.5 HIV抗體確認試驗結果報告
確認試驗由確認實驗室根據檢測結果出具「HIV抗體確認檢測報告單」(附表3),報告HIV抗體陽性(+)、HIV抗體陰性(-)及HIV抗體不確定(±)。
5.2.5.1 符合HIV-1抗體陽性判斷標准,報告「HIV-1抗體陽性(+)」,並按規定做好檢測後咨詢、保密和疫情報告工作。
5.2.5.2 符合HIV抗體陰性判斷標准,報告「HIV抗體陰性(-)」。如果近期有高危行為,如性亂、注射毒品等,或有急性流感樣症狀等情況,為排除因「窗口期」而出現的假陰性結果,建議高危行為後3個月時再做抗體檢測。也可進行HIV-1 P24抗原或HIV核酸檢測,作為輔助診斷。
5.2.5.3 符合HIV抗體不確定判斷標准,報告「HIV抗體不確定(±)」,在備注中應註明「3個月後復檢」,同時進行以下處理:
(1) 隨訪復檢:每3個月隨訪復檢1次,連續2次,共6個月。如果檢測時暴露時間已超過3個月,則在3個月後隨訪1次即可。將前後2份樣品同時檢測,仍呈不確定或陰性則報告HIV抗體陰性,如果在隨訪期間發生帶型進展,符合HIV抗體陽性判定標准則報告HIV-1或HIV-2抗體陽性。
(2) 必要時可做HIV-1 P24抗原或HIV核酸測定,但檢測結果只能作為輔助診斷依據,確認報告要依據血清學隨訪結果。
5.2.6 發出確認報告的同時要做好檢測後咨詢。
5.2.7 HIV抗體確認報告由1名具有高級衛生技術職稱的人員復核簽字,按原送檢程序反饋。如確認對象戶口不屬於本轄區,確認報告應同時抄送HIV感染者戶口所在地的省艾滋病確認中心實驗室。其它系統確認的地方人員(包括本地和外地),也應及時向當地衛生行政部門和省艾滋病確認中心實驗室報告。
5.2.8 省艾滋病確認中心實驗室難以確認的樣品,送國家艾滋病參比實驗室確認。同一受檢對象的樣品在不同實驗室得到不一致的確認結果時,由國家艾滋病參比實驗室和艾滋病確認實驗室審評及技術指導專家組予以仲裁。
D. java tea是一種什麼茶
JavaTea葉片含有Methylripariochromene甲可能severalpharmacological有關的行動降壓活動。 Sinensetin andtetramethlylscutellarein in Java Tea leaves also proven have cytostaticactivity towards ascites tumour cells. Sinensetin andtetramethlylscutellarein在Java茶葉也證明有腹水cytostaticactivity對腫瘤細胞。 Scientific studies also show that JavaTea has anti-allergenic, anti-inflammatory, anti-fungal, anti-bacterialpropertiesand hypoglycemic effects.科學研究還表明, JavaTea具有抗過敏,抗炎,抗真菌,抗bacterialpropertiesand降血糖作用。 Java Tea is sometimes used to treat gout,diabetes and rheumatism. In vitro , the flavonoids sinensetin andtetramethylscutellarein in Java Tea has been shown to inhibit 15-lipoxygenase,an enzyme thought to be involved in the development of atherosclerosis.爪哇茶有時是用來治療痛風,糖尿病,風濕病。 體外 ,黃酮sinensetin andtetramethylscutellarein在Java茶已經顯示出抑制15脂肪氧化酶,這種酶被認為參與動脈粥樣硬化的發展。
用途:爪哇茶已用於沖廁(灌溉)泌尿系統的情況下腫脹(炎症)和腎結石。 It has also been used for bacterial bladder (urinary tract) infections.它還被用於細菌性膀胱(尿路)感染。 Some herbal/diet supplement procts have been found to contain possibly harmful impurities/additives.一些草葯/飲食補充產品已被發現含有可能有害的雜質/添加劑。 Check with your pharmacist for more details regarding the particular brand you use.請與您的葯劑師更詳細說明具體的品牌使用。 The FDA has not reviewed this proct for safety or effectiveness.美國食品和葯物管理局沒有審查該產品的安全性或有效性。 Consult your doctor or pharmacist for more details.咨詢您的醫生或葯劑師的更多細節。
HOW TO USE: Take this proct by mouth as directed. 如何使用:本產品以經口的指示。 Follow all directions on the proct package.按照各個方向的產品包裝。 If you are uncertain about any of the information, consult your doctor or pharmacist.如果您不確定有關的任何信息,咨詢您的醫生或葯劑師。 It is important to drink plenty of fluids while you are taking this proct.重要的是,喝大量的液體,而您正在服用此產品。 If your condition persists or worsens, or if you think you may have a serious medical problem, seek immediate medical attention.如果您的條件依然存在或惡化,或者如果您認為自己可能會產生嚴重的醫療問題,立即尋求醫療照顧。
SIDE EFFECTS: No side effects have currently been reported. 副作用:無副作用,目前已報告。 If you notice any possible side effects, contact your doctor or pharmacist.如果您發現任何可能帶來的副作用,請聯系您的醫生或葯劑師。
PRECAUTIONS: If you have any of the following health problems, consult your doctor before using this proct: swelling ( edema ) e to heart or kidney disease . 預防措施:如果你有下列任何健康問題,徵求你的醫生在使用本產品:腫脹( 水腫 )由於心臟病或腎臟疾病 。 Liquid preparations of this proct may contain sugar and/or alcohol.液體制劑的產品可能含有糖和/或酒精。 Caution is advised if you have diabetes, alcohol dependence or liver disease.建議注意如果您有糖尿病,酒精依賴或肝臟疾病。 Ask your doctor or pharmacist about the safe use of this proct.問問你的醫生或葯劑師的安全使用本產品。 Java tea is not recommended for use ring pregnancy .爪哇茶是不建議使用在懷孕期間。 Consult your doctor before using this proct.咨詢你的醫生才能使用這種產品。 Because of the potential risk to the infant, breast-feeding while using this proct is not recommended.由於潛在的風險的嬰兒,母乳喂養而使用本產品不推薦。 Consult your doctor before breast-feeding.你的醫生咨詢之前,母乳喂養。
DRUG INTERACTIONS: Before using this proct, tell your doctor or pharmacist of all prescription and nonprescription medications you may use. 葯物相互作用:在使用本產品,請告訴您的醫生或葯劑師的所有處方葯和非處方葯可以使用。
E. 裂解液ripa加少了會有什麼影響
RIPA裂解液(RIPA
Lysis
Buffer)是一種傳統的細胞組織快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白樣品可以用於常規的Western、IP等。
RIPA的本意是Radio
Immunoprecipitation
Assay。RIPA裂解液的配方有很多種,根據其裂解液的強度大致可以分為強、中、弱三類。關於不同的RIPA裂解液以及我們生產的其它裂解液的主要特點和差異,以及如何選擇裂解液可參考附錄。
RIPA裂解液(強)的主要成分為50mM
Tris(pH
7.4),150mM
NaCl,1%TritonX-100,1%
sodium
deoxycholate,0.1%
SDS,以及2mM
sodium
pyrophosphate,25mM
β-glycerophosphate,1mM
EDTA,1mM
Na3VO4,0.5
ug/ml
leupeptin等多種抑制劑。可以有效抑制蛋白降解。
RIPA裂解液(中)的主要成分為50mM
Tris(pH
7.4),150mM
NaCl,1%
NP-40,0.5%
sodium
deoxycholate。
F. 救命!這是不是艾滋病潛伏期症狀
艾滋病沒有任何典型的預測症狀,出現任何症狀都不能就此判斷為艾滋病.
如果有高危行為,對自己感染HIV有懷疑,那麼請去做HIV抗體檢測,現在做HIV抗體檢測已經完全免費了.
去疾病預防控制中心做HIV抗體檢測可以匿名,無須任何證件,並且是免費的.
艾滋病潛伏期是沒有任何症狀的,只有發展為艾滋病病人才會有各種臨床症狀.例如各種機會性感染和惡性腫瘤.
而艾滋病急性感染期並不是每個人都有症狀的,只有50%到75%的人有症狀.